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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » 與PMD-19T連接問題
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小冀-版主 (著名寫手)
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[求助]
與PMD-19T連接問題 已有6人參與
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| 用PMD-19T載體與我的目的基因片段（3.3kb）鏈接，之前用高保真酶進行PCR擴增后通過加A試劑盒進行加A尾，之后熱擊轉化，涂布后長出菌落，但是提質(zhì)粒鑒定后發(fā)現(xiàn)載體自連（單雙酶切條帶一樣，只有一條，有一個不一樣的，但單切有出現(xiàn)兩條條帶）；后來用一步克隆試劑盒進行連接，但涂布后沒有菌落，一直不知道是什么原因，請高人指教··· |
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8樓2014-06-17 17:59:44
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