急急急，求大神們救救急（。。。。。。。。。。。。。。。。湊字?jǐn)?shù)。。。。。。。。。。。。。。。。。前面的帖子以及刪了，怎么這個還提示
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老師讓我在引物（PCR引物）序列中引入蛋白標(biāo)簽flag，方便后續(xù)的純化。我的蛋白是分泌蛋白，我查到分泌蛋白一般建議把標(biāo)簽插在C端，求問大神們，我這樣設(shè)計對不對？

上游引物F ：CCC（保護堿基）+ AAGCTT （酶切位點）+ KOZAK序列 +引物序列+GATTACAAGGATGACGACGATAAG（標(biāo)簽序列）

下游引物R：GC（保護堿基）+ GTCGAC（酶切位點） +引物序列 +CTTATCGTCGTCATCCTTGTAATC（flag標(biāo)簽序列反向互補）

我之前查的有人說說標(biāo)簽蛋白只需要加在上游引物就行，下游不用加？但那樣兩個的TM值不就差距很大了嗎？ 返回小木蟲查看更多