 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 1969 | 回復: 12 | ||
[求助]
【新手】DNS法測α淀粉酶 抑制實驗 反應進程曲線遇到問題
|
||
|
本人是個酶方面的新手，想做某種物質對淀粉酶的抑制作用，這是第一次，采用的是DNS法測定產物糖的方法。 ① 我想先做反應進程曲線，確定合適的酶活和反應時間。 a. 預實驗，1%的淀粉濃度，我選取了0.1濃度的酶，結果1-6min的OD值都是在0的上下浮動，我懷疑是淀粉酶失活了，或者濃度太低了（酶溶液一開始不懂，放在了冷藏一晚上，估計失活了） b.于是，我配置了1濃度的酶，然后配置完成立刻去測定，從1-10min的OD值都是0.5左右波動 c. 我蒙圈了，嗯，可能是酶濃度太大了，所以反應很快，1min之內就把所有淀粉都反應成了糖。于是，我配置了0.6和0.3的濃度的酶，測定1-6min的OD值變化，然后0.3的不知道為什么是亂七八糟的，0.6的結果還行，1min的時候是0.2左右，但是從2min開始之后就全部都是0.5左右。 d.讓我很奔潰，合適的酶濃度和反應時間，到底怎么才能準確的測定出來，我的問題到底出在那里？？？ ② 看文獻，有的測定一種物質對淀粉酶得抑制，做了陰性、陽性和空白對照，可是有的實驗就沒有陽性對照，一定要做嗎？ ③ 看文獻，有一篇文獻的抑制劑是有有機溶劑溶解的，就是水和乙醇一定比例，那我在想，乙醇不會對酶的活性產生影響嗎？這篇文章科學么，居然做出來，結果很好，而且還發(fā)表了！ 求大神幫忙，我是試了好多還不出滿意結果，感覺奔潰了！ |
回復此樓» 猜你喜歡
331求調劑，一志愿合工大食品工程（086003）
已經有2人回復
-
303分一志愿江南大學發(fā)酵工程學碩本科參加競賽有實驗室經歷有酒廠質檢員工作經歷
已經有5人回復
-
食品科學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經有101人回復
-
331食品工程求調劑
已經有1人回復
-
一志愿福建農林大學 09 食品與營養(yǎng) 初試323
已經有0人回復
-
08600生物與醫(yī)藥調劑，其他方向也可以
已經有1人回復
-
鈣離子的存在形式
已經有1人回復
-
食品工程一志愿西北大學309分求調劑
已經有1人回復
-
26考研農業(yè)管理調劑 263分 誠意求調劑
已經有0人回復
-
食品與營養(yǎng)313分調劑
已經有0人回復
4樓2016-03-11 16:11:03
★ ★ ★ ★ ★
RX_豆丁(99503102代發(fā)): 金幣+5, 謝謝熱心應助，繼續(xù)加油！ 2016-06-30 10:51:38
RX_豆丁(99503102代發(fā)): 金幣+5, 謝謝熱心應助，繼續(xù)加油！ 2016-06-30 10:51:38
|
然后關于對照和空白，規(guī)范的話是都要做的，不過有的試劑是無色的，所以就不需要做空白，可以省掉。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2016-03-11 16:13:58
|
然后，乙醇是否抑制酶活，作者這里是做了空白對照的，把只加有機溶劑的那組OD值減掉就好了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
RX_豆丁6樓2016-03-11 16:14:48
2樓2016-03-10 15:52:48
3樓2016-03-11 10:09:11
7樓2016-03-11 16:16:36
|
還有啊，做這種梯度實驗最好一次性做完，就是各種梯度在一塊板子里，同時做，因為96板對操作要求較高，如果不能確保操作，那么就一次把所有梯度全部做完，這樣的結果比較可靠 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2016-03-11 16:18:38
9樓2016-03-11 17:41:29
10樓2016-03-11 17:41:55
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 RX_豆丁 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 生物學學碩求調劑 +4 | 小羊睡著了? 2026-03-23 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[基金申請] 請教下大家 2026年國家基金申請是雙盲審嗎？ +3 | lishucheng1 2026-03-22 | 4/200 |
|
|
[考研] 一志愿武理材料工程348求調劑 +6 | ￣^￣゜汗 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 303求調劑 +4 | 元夕元 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 生物學一志愿985，分數(shù)349求調劑 +6 | zxts12 2026-03-21 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 291 求調劑 +4 | 化工2026屆畢業(yè)?/a> 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 263求調劑 +6 | yqdszhdap－ 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料與化工085600，總分304，本科有兩篇sci參與，求調劑 +4 | 幸運的醬醬 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 289材料與化工（085600）B區(qū)求調劑 +3 | 這么名字咋樣 2026-03-22 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 324求調劑 +6 | lucky呀呀呀鴨 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調劑院校信息 +6 | CX 330 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[基金申請] 山東省面上項目限額評審 +4 | 石瑞0426 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 【考研調劑】化學專業(yè) 281分，一志愿四川大學，誠心求調劑 +11 | 吃吃吃才有意義 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 278求調劑 +9 | 煙火先于春 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 南京大學化學376求調劑 +3 | hisfailed 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調劑一志愿南京航空航天大學289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0817 化學工程 299分求調劑 有科研經歷 有二區(qū)文章 +22 | rare12345 2026-03-18 | 22/1100 |
|
|
|
[考研] 廣西大學家禽遺傳育種課題組2026年碩士招生（接收計算機專業(yè)調劑） +3 | 123阿標 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿福大288有機化學，求調劑 +3 | 小木蟲200408204 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研求調劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|