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HX91926銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
有沒有做過巰基檢測的?求教? 已有1人參與
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我看原始文獻1959那篇,寫的是60 nm dtnb加大約2000 nm 巰基,我們做的大約60 nm 巰基加大約1000 nm DTNB,但是增加樣品量,吸光度不變?但是標曲會隨著樣品量增加?有做過的嗎? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (正式寫手)
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研究蛋白的氧化還原活性,我們選擇谷胱甘肽為反應底物,氧化性谷胱甘肽GSH在還原劑的作用下被還原成GSSG,GSH能和5,5'二硫代雙(2-硝基苯甲酸) DTNB反應生成黃色產物2-硝基-5-硫代苯甲酸(2-nitro-5-thiobenzoic acid): (1)將表達出的蛋白充分混合后加入2.5 mM的GSH,在水浴鍋30℃左右進行溫浴反應30 min; (2)將DTNB加入到反應中,充分反應直到黃色物質穩(wěn)定后,進行OD412檢測; (3)以2.5mM GSH加入DTNB后反應生成2-nitro-5-thiobenzoic acid的OD412值(不加任何目的蛋白)為對照標準; (4)對比(2)和(3)之間OD412值的差異; 這是之前其他人做的實驗 僅供參考 |
銅蟲 (小有名氣)
金蟲 (正式寫手)
銅蟲 (小有名氣)
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