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HX91926銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
有沒(méi)有做過(guò)巰基檢測(cè)的？求教？ 已有1人參與
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我看原始文獻(xiàn)1959那篇，寫(xiě)的是60 nm dtnb加大約2000 nm 巰基，我們做的大約60 nm 巰基加大約1000 nm DTNB，但是增加樣品量，吸光度不變？但是標(biāo)曲會(huì)隨著樣品量增加？有做過(guò)的嗎？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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5樓2016-03-21 15:48:17
永恒_99
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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研究蛋白的氧化還原活性，我們選擇谷胱甘肽為反應(yīng)底物，氧化性谷胱甘肽GSH在還原劑的作用下被還原成GSSG，GSH能和5,5'二硫代雙（2-硝基苯甲酸） DTNB反應(yīng)生成黃色產(chǎn)物2-硝基-5-硫代苯甲酸（2-nitro-5-thiobenzoic acid）： （1）將表達(dá)出的蛋白充分混合后加入2.5 mM的GSH，在水浴鍋30℃左右進(jìn)行溫浴反應(yīng)30 min； （2）將DTNB加入到反應(yīng)中，充分反應(yīng)直到黃色物質(zhì)穩(wěn)定后，進(jìn)行OD412檢測(cè)； （3）以2.5mM GSH加入DTNB后反應(yīng)生成2-nitro-5-thiobenzoic acid的OD412值（不加任何目的蛋白）為對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)； （4）對(duì)比（2）和（3）之間OD412值的差異； 這是之前其他人做的實(shí)驗(yàn) 僅供參考 |
2樓2016-03-19 21:38:21
HX91926
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3樓2016-03-20 19:46:42
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4樓2016-03-20 20:02:55
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