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雙熒光素酶報告基因問題 LUC REN 已有1人參與
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1個轉錄因子，1個啟動子，想要研究轉錄因子對啟動子的調控。 實驗設計： 1、構建轉錄因子過表達載體，TF 2、構建啟動子+LUC載體，p 3、單獨的一個載體，REN海腎熒光素酶載體作為內參，ren 4、35sTF+p+ren 35s空載+p+ren 3個載體共轉化擬南芥原生質體，使用Promega試劑盒，單管測LUC，REN熒光，不是用的酶標儀。 結果：不同樣品之間，海腎熒光素酶REN的值差別挺大，最小的500，最大的10000�？瞻讓φ眨ㄔ|體沒有加質粒，后面步驟一樣的），100左右，所以轉化是成功了吧。 問題：理論上來說，不同樣品之間的REN值應該差不多的啊，感覺操作也沒啥問題，差異這么大，可能的原因有哪些？ 謝謝啦～ |
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2樓2016-03-26 15:15:59
3樓2016-03-26 15:38:45
心拼命的痛
銀蟲 (初入文壇)
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- 專業(yè): 園藝作物采后生物學
4樓2016-05-07 15:55:05
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質粒間產(chǎn)生cross talk導致，可換成pGl4 Renilla-TK的載體，并對轉錄因子質粒，F(xiàn)irefly和Renilla質粒做優(yōu)化 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2016-06-14 22:16:24
科研屌絲007
新蟲 (小有名氣)
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6樓2016-08-15 12:58:03
硫蘇妖兒
木蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 植物學
7樓2017-02-21 12:16:01
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老師你好，我也在做這方面的實驗，我想問一下，這個熒光素酶報告基因的是用什么儀器檢測的，可以用酶標儀嗎？還是熒光顯微鏡，如果是熒光顯微鏡的話，是普通的就可以還是的用倒置的？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2017-02-27 22:07:05
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