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wangshumin55新蟲 (小有名氣)
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[求助]
有哪位蟲友測過PG酶的酶活？請問Cbz-Gln-Gly與Z-Gln-Gly是同一個試劑嗎？ 已有1人參與
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有哪位蟲友測過谷氨酰胺酶（PG酶）的酶活？我查了一下，底物溶液需要二肽Cbz-Gln-Gly；請問Cbz-Gln-Gly與Z-Gln-Gly是同一個試劑嗎？有沒有哪位蟲友知道具體該怎樣測PG酶的酶活呢？底物又是在哪里買到的？請各位蟲友給予指點，多謝啦 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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不好意思，出去嗨了，才看到。 多聚半乳糖醛酸酶( PG)活性：Amnuaysin等（2012）和Figueroa等（2010）的方法。取2g樣品，用6mL酶提取液( 6%NaCl，內(nèi)含0.6%EDTA，1%PVP) 勻漿 然后再10000r/min離心20min，上清液即為粗酶提取液，待用。將酶提取液稀釋10倍，取稀釋液0.1 mL，加0.5%的果膠溶液( pH 4.0) 1.0 mL，對照為pH 4.0的醋酸緩沖液，37℃恒溫反應(yīng)30min后加入0.9 mL DNS試劑，沸水浴5 min，冷卻，加水定容至15 mL，搖勻，540 nm波長處測吸光值 以D-( +) 半乳糖醛酸標準溶液作標準曲線，以每分鐘每克鮮樣37℃時分解果膠產(chǎn)生1 g的游離半乳糖醛酸為1個酶活力單位( U)。 |
4樓2016-04-09 21:28:46
windygo
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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我測過，但是不知道要用你提到的試劑。 不行就換個方法吧，我當時用的就挺簡單的。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
wangshumin552樓2016-04-09 09:36:18
wangshumin55
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3樓2016-04-09 11:32:51
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。。。不過還是非常感謝您5樓2016-04-10 14:30:42
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