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wangshumin55新蟲 (小有名氣)
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[求助]
有哪位蟲友測(cè)過PG酶的酶活?請(qǐng)問Cbz-Gln-Gly與Z-Gln-Gly是同一個(gè)試劑嗎? 已有1人參與
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有哪位蟲友測(cè)過谷氨酰胺酶(PG酶)的酶活?我查了一下,底物溶液需要二肽Cbz-Gln-Gly;請(qǐng)問Cbz-Gln-Gly與Z-Gln-Gly是同一個(gè)試劑嗎?有沒有哪位蟲友知道具體該怎樣測(cè)PG酶的酶活呢?底物又是在哪里買到的?請(qǐng)各位蟲友給予指點(diǎn),多謝啦 |

新蟲 (小有名氣)

木蟲 (正式寫手)
咸蛋超人
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我測(cè)過,但是不知道要用你提到的試劑。 不行就換個(gè)方法吧,我當(dāng)時(shí)用的就挺簡(jiǎn)單的。 |

新蟲 (小有名氣)

木蟲 (正式寫手)
咸蛋超人
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不好意思,出去嗨了,才看到。 多聚半乳糖醛酸酶( PG)活性:Amnuaysin等(2012)和Figueroa等(2010)的方法。取2g樣品,用6mL酶提取液( 6%NaCl,內(nèi)含0.6%EDTA,1%PVP) 勻漿 然后再10000r/min離心20min,上清液即為粗酶提取液,待用。將酶提取液稀釋10倍,取稀釋液0.1 mL,加0.5%的果膠溶液( pH 4.0) 1.0 mL,對(duì)照為pH 4.0的醋酸緩沖液,37℃恒溫反應(yīng)30min后加入0.9 mL DNS試劑,沸水浴5 min,冷卻,加水定容至15 mL,搖勻,540 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光值 以D-( +) 半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)溶液作標(biāo)準(zhǔn)曲線,以每分鐘每克鮮樣37℃時(shí)分解果膠產(chǎn)生1 g的游離半乳糖醛酸為1個(gè)酶活力單位( U)。 |

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