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wangshumin55新蟲 (小有名氣)
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[求助]
有哪位蟲友測(cè)過(guò)PG酶的酶活？請(qǐng)問(wèn)Cbz-Gln-Gly與Z-Gln-Gly是同一個(gè)試劑嗎？ 已有1人參與
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有哪位蟲友測(cè)過(guò)谷氨酰胺酶（PG酶）的酶活？我查了一下，底物溶液需要二肽Cbz-Gln-Gly；請(qǐng)問(wèn)Cbz-Gln-Gly與Z-Gln-Gly是同一個(gè)試劑嗎？有沒(méi)有哪位蟲友知道具體該怎樣測(cè)PG酶的酶活呢？底物又是在哪里買到的？請(qǐng)各位蟲友給予指點(diǎn)，多謝啦 |
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mao1023
木蟲 (小有名氣)
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7樓2016-04-10 20:28:31
windygo
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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我測(cè)過(guò)，但是不知道要用你提到的試劑。 不行就換個(gè)方法吧，我當(dāng)時(shí)用的就挺簡(jiǎn)單的。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
wangshumin552樓2016-04-09 09:36:18
wangshumin55
新蟲 (小有名氣)
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3樓2016-04-09 11:32:51
windygo
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【答案】應(yīng)助回帖
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不好意思，出去嗨了，才看到。 多聚半乳糖醛酸酶( PG)活性：Amnuaysin等（2012）和Figueroa等（2010）的方法。取2g樣品，用6mL酶提取液( 6%NaCl，內(nèi)含0.6%EDTA，1%PVP) 勻漿 然后再10000r/min離心20min，上清液即為粗酶提取液，待用。將酶提取液稀釋10倍，取稀釋液0.1 mL，加0.5%的果膠溶液( pH 4.0) 1.0 mL，對(duì)照為pH 4.0的醋酸緩沖液，37℃恒溫反應(yīng)30min后加入0.9 mL DNS試劑，沸水浴5 min，冷卻，加水定容至15 mL，搖勻，540 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光值 以D-( +) 半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)溶液作標(biāo)準(zhǔn)曲線，以每分鐘每克鮮樣37℃時(shí)分解果膠產(chǎn)生1 g的游離半乳糖醛酸為1個(gè)酶活力單位( U)。 |
4樓2016-04-09 21:28:46
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