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tbdlzf新蟲 (初入文壇)
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[求助]
流式細胞儀檢測抗體染色細胞 已有1人參與
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本人在做AcMNPV病毒感染sf9昆蟲細胞實驗,加入病毒感染3-10個小時后取樣,處理后上流式檢測,收集的細胞數(shù)是20000個,分析細胞熒光強度分布情況。 細胞樣是這樣處理的:1200r/min離心5min后用PBS(加0.1%NaN3、3%BSA)清洗、加固定劑、清洗、再加抗體孵育,洗一遍后檢測。處理方法都是按說明書來的,可是做了很多遍了,結(jié)果都和陰性對照結(jié)果沒什么差別。求高手指點。ü潭▌┦莑ife technologies的FIX&PERM,抗體是santa cruz的ACV1-FITC,可以特異結(jié)合病毒上的GP64蛋白,檢測通道是FL1H) 圖中紫色部分是實驗組,綠色線條是陰性對照。文獻里面兩個波峰應(yīng)該是可以錯開的。 IMG_20160421_154037.jpg@gyesang |
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新蟲 (初入文壇)
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抗體是結(jié)合GP64蛋白的,也就是說理論上胞內(nèi)和胞外都應(yīng)該能結(jié)合抗體。破膜處理是有的,在固定洗滌后跟抗體一起加的破膜劑。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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