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mike546至尊木蟲(chóng) (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于引物設(shè)計(jì)/熒光定量PCR的幾個(gè)問(wèn)題請(qǐng)教一下大家 已有1人參與
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樓主環(huán)境專業(yè)，初次接觸分子實(shí)驗(yàn)，提的是植物的RNA，然后反轉(zhuǎn)錄成cDNA，再去熒光定量有幾個(gè)問(wèn)題想請(qǐng)教一下大家： （1）提出RNA之后，測(cè)了OD260，然后控制每個(gè)樣品RNA濃度一致，那反轉(zhuǎn)錄后還要測(cè)280260的比值嗎，不測(cè)的話，反轉(zhuǎn)錄過(guò)程會(huì)不會(huì)有影響？測(cè)的話那之前的RNA 的OD260可以不測(cè)嘛 （2）引物設(shè)計(jì)的時(shí)候，在NCBI上，進(jìn)入某個(gè)基因的mRNA的詳細(xì)信息，要把序列復(fù)制到設(shè)計(jì)軟件上，那這個(gè)序列是這條mRNA的整段序列還是點(diǎn)一下“CDS”然后下面有顏色標(biāo)注的那一段呢？ （3）如果想做土壤里面的基因，按照這個(gè)路線然后去熒光定量可行嗎？直接用提DNA的試劑盒提取土壤的DNA為什么不能拿去熒光定量呢？ 幾個(gè)很小白的問(wèn)題，初次接觸，大家見(jiàn)笑了，懇請(qǐng)大家?guī)蛶兔�，感激不盡！ |
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2樓2016-05-20 11:14:22
3樓2016-05-20 11:17:56
mike5464樓2016-05-20 11:23:23
mike546
至尊木蟲(chóng) (正式寫手)
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5樓2016-05-20 12:43:36
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6樓2016-05-20 12:44:06
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7樓2016-05-20 12:44:22
winter121
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。多謝！ 8樓2016-07-04 21:52:23
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9樓2016-07-04 21:53:21
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