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mike546至尊木蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于引物設(shè)計(jì)/熒光定量PCR的幾個(gè)問題請教一下大家 已有1人參與
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樓主環(huán)境專業(yè),初次接觸分子實(shí)驗(yàn),提的是植物的RNA,然后反轉(zhuǎn)錄成cDNA,再去熒光定量有幾個(gè)問題想請教一下大家: (1)提出RNA之后,測了OD260,然后控制每個(gè)樣品RNA濃度一致,那反轉(zhuǎn)錄后還要測280260的比值嗎,不測的話,反轉(zhuǎn)錄過程會不會有影響?測的話那之前的RNA 的OD260可以不測嘛 (2)引物設(shè)計(jì)的時(shí)候,在NCBI上,進(jìn)入某個(gè)基因的mRNA的詳細(xì)信息,要把序列復(fù)制到設(shè)計(jì)軟件上,那這個(gè)序列是這條mRNA的整段序列還是點(diǎn)一下“CDS”然后下面有顏色標(biāo)注的那一段呢? (3)如果想做土壤里面的基因,按照這個(gè)路線然后去熒光定量可行嗎?直接用提DNA的試劑盒提取土壤的DNA為什么不能拿去熒光定量呢? 幾個(gè)很小白的問題,初次接觸,大家見笑了,懇請大家?guī)蛶兔,感激不盡! |

至尊木蟲 (正式寫手)
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