 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 4677 | 回復(fù): 15 | ||
Dugutoufu銅蟲 (初入文壇)
|
[求助]
運(yùn)用crispr/cas9進(jìn)行基因敲除，pCas質(zhì)粒總是無(wú)法轉(zhuǎn)進(jìn)感受態(tài)中，求大神的指導(dǎo)啊~ 已有2人參與
|
|
產(chǎn)氣腸桿菌與大腸桿菌的同源性很高，理論上可以進(jìn)行crispr基因敲除，但是我將pCas電轉(zhuǎn)了很多次，還是轉(zhuǎn)不進(jìn)去，制備的感受態(tài)沒有問題，質(zhì)粒濃度大約200ng，電轉(zhuǎn)的條件是：2200V，200Ω，25uF，2mm的電轉(zhuǎn)杯，電轉(zhuǎn)時(shí)間大概在5毫秒左右，菌體在抗性板上長(zhǎng)，抗性板是kan50，大約18個(gè)小時(shí)之后能長(zhǎng)出菌落。挑取單菌落在同樣抗性的液體里也能長(zhǎng)，但是再提取質(zhì)粒驗(yàn)證時(shí)，完全提不出來(lái)，想請(qǐng)問各路大神這是什么原因��？做了兩個(gè)月~~ 求大神們提提意見 @youlinglyw@wizardfan@飛約瘋?cè)嗽?/u>@biostar2009 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有267人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
不愛做實(shí)驗(yàn)
銀蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 37 (小學(xué)生)
- 金幣: 316.7
- 紅花: 5
- 帖子: 399
- 在線: 68.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 3124215
- 注冊(cè): 2014-04-09
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物信息學(xué)
11樓2016-08-14 13:04:43
黃小萌萌
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 310.2
- 散金: 1
- 帖子: 122
- 在線: 77.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 4085495
- 注冊(cè): 2015-09-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 腫瘤化學(xué)藥物治療
2樓2016-05-26 10:43:35
黃小萌萌
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 310.2
- 散金: 1
- 帖子: 122
- 在線: 77.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 4085495
- 注冊(cè): 2015-09-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 腫瘤化學(xué)藥物治療
★
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-08-15 07:58:08
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-08-15 07:58:08
|
卡那霉素做抗生素合理嗎？這個(gè)菌本身有沒有這個(gè)抗性基因？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-05-26 10:44:31
Dugutoufu
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 11.5
- 帖子: 13
- 在線: 36.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 4440297
- 注冊(cè): 2016-02-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
★ ★
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-08-15 07:58:14
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-08-15 07:58:33
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-08-15 07:58:14
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-08-15 07:58:33
|
kan沒有失效呢～我的質(zhì)粒有點(diǎn)大，12.5k 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2016-05-26 19:29:16
Dugutoufu
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 11.5
- 帖子: 13
- 在線: 36.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 4440297
- 注冊(cè): 2016-02-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
★
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-08-15 07:59:03
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-08-15 07:59:03
|
這個(gè)菌本身是氨芐抗性，pCas是kan抗性，所以不會(huì)出現(xiàn)抗性不相容的問題 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
5樓2016-05-26 19:31:03
ken19860823
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
- 金幣: 3574.2
- 紅花: 9
- 帖子: 875
- 在線: 107.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 3150033
- 注冊(cè): 2014-04-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 免疫生物學(xué)
6樓2016-05-27 19:28:01
18716248350
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 5 (幼兒園)
- 金幣: 948.8
- 散金: 36
- 紅花: 2
- 帖子: 247
- 在線: 116小時(shí)
- 蟲號(hào): 4438910
- 注冊(cè): 2016-02-26
- 專業(yè): 預(yù)防醫(yī)學(xué)其他科學(xué)問題
7樓2016-05-27 22:42:44
kungfu2016
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 3370.9
- 紅花: 1
- 帖子: 558
- 在線: 56.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 4548567
- 注冊(cè): 2016-03-28
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
8樓2016-05-28 07:24:13
Bioexperixgs
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 13 (小學(xué)生)
- 金幣: 672.9
- 散金: 337
- 紅花: 8
- 帖子: 330
- 在線: 39.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 2330746
- 注冊(cè): 2013-03-08
- 專業(yè): 病原微生物變異與耐藥
|
目標(biāo)菌是什么？質(zhì)粒擴(kuò)增菌又是什么？如果你的質(zhì)粒已經(jīng)重組到基因組中，那是可能會(huì)導(dǎo)致質(zhì)粒丟失的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2016-05-29 09:18:48
10樓2016-08-14 12:31:11
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 Dugutoufu 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿海大，0703化學(xué)學(xué)碩304分，有大創(chuàng)項(xiàng)目，四級(jí)已過(guò) +3 | 幸運(yùn)哩哩 2026-03-22 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿西安交通大學(xué)材料工程專業(yè) 282分求調(diào)劑 +10 | 楓橋ZL 2026-03-18 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩 348分求調(diào)劑 +3 | 冬辭. 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +3 | 喜歡還是不甘心 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩333求調(diào)劑 +3 | 北道巷 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +4 | 肆叁貳壹22 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 336求調(diào)劑 +5 | rmc8866 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 哇呼哼呼哼 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +4 | 某某某某位 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 279分求調(diào)劑 一志愿211 +14 | chaojifeixia 2026-03-19 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +3 | Jack?k?y 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專業(yè)求調(diào)劑 +6 | hanamiko 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +10 | S.H1 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 司空. 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿武漢理工材料工程專碩調(diào)劑 +9 | Doleres 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇州大學(xué)材料求調(diào)劑，總分315（英一） +5 | sbdksD 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 295復(fù)試調(diào)劑
+8
|
簡(jiǎn)木ChuFront 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程專碩求調(diào)劑 +10 | 慕寒mio 2026-03-16 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | Yanyali 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +5 | 大米飯！ 2026-03-15 | 5/250 |
|