 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (5589)
- >考研 (2584)
- >導(dǎo)師招生 (2440)
- >文獻(xiàn)求助 (461)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (396)
- >碩博家園 (249)
- >考博 (160)
- >招聘信息布告欄 (137)
- >博后之家 (103)
- >休閑灌水 (92)
- >論文投稿 (81)
- >綠色求助(高懸賞) (57)
- >基金申請(qǐng) (47)
- >找工作 (47)
- >SciFinder/Reaxys (34)
- >藥學(xué) (32)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1316 | 回復(fù): 4 | ||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
zy晨曦新蟲(chóng) (小有名氣)
|
[求助]
上樣量對(duì)樹(shù)脂純化蛋白的影響 已有2人參與
|
|||
| 首次使用弱陰離子交換樹(shù)脂純化蛋白，第一次上柱70%的吸附量后洗脫，低濃度鹽可以洗脫出來(lái)蛋白，第二次上樣量減少到50%左右上柱后洗脫，增加鹽濃度才能洗脫蛋白，這是為何。第一次上樣前樹(shù)脂再生是利用1M氯化鈉，第二次上樣前再生是利用堿-鹽再生。并且有個(gè)問(wèn)題，弱陰離子交換樹(shù)脂的Ph如何調(diào)整到合適的ph，現(xiàn)在我都是倒出來(lái)調(diào)好ph然后裝柱，有個(gè)朋友說(shuō)不用調(diào)整ph。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
342求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
070300化學(xué)專(zhuān)業(yè)279調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
求調(diào)劑：085600材料與化工，考材科基，總分319
已經(jīng)有20人回復(fù)
-
一志愿華東理工大學(xué)，080500學(xué)碩，317分，求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
一志愿a區(qū)211，085601-307分求調(diào)劑
已經(jīng)有23人回復(fù)
-
合肥區(qū)域性重點(diǎn)一本招收調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
材料調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
288求調(diào)劑 一志愿哈工大 材料與化工
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
材料科學(xué)與工程339求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
化學(xué)308分調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- DNA凝膠回收方法及常見(jiàn)問(wèn)題
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 【資料】分子生物學(xué)常見(jiàn)問(wèn)題解答
已經(jīng)有30人回復(fù)
- 求助翻譯個(gè)人簡(jiǎn)歷，藥學(xué)專(zhuān)業(yè)或分析專(zhuān)業(yè)同學(xué)幫幫忙
已經(jīng)有0人回復(fù)
- 【分享】蛋白質(zhì)純化個(gè)人總結(jié)2
已經(jīng)有38人回復(fù)
- 【資源】液相色譜柱原理
已經(jīng)有14人回復(fù)
zy晨曦
新蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 2258.4
- 散金: 10
- 紅花: 1
- 帖子: 205
- 在線: 77.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1755080
- 注冊(cè): 2012-04-14
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 微生物遺傳育種學(xué)
|
謝謝您的回復(fù)，首先ph問(wèn)題是因?yàn)闃?shù)脂在洗脫過(guò)程中或是放置一天后流出液的ph升高，由原先的7.5上升至8.0，所以再次使用時(shí)我都會(huì)將ph調(diào)到7.5.利用0.025的磷酸鹽緩沖液要沖洗很長(zhǎng)時(shí)間，所以就將樹(shù)脂倒出調(diào)ph。 上樣量是隨意改變的，上樣量是樹(shù)脂最大吸附量的70%和50%，因?yàn)榈谝淮问褂米畲笪搅康?0%上樣，出現(xiàn)了0.05M的氯化鈉洗脫出目的蛋白（以前從沒(méi)有洗脫出來(lái)，估計(jì)和上樣量或是樹(shù)脂使用次數(shù)過(guò)多導(dǎo)致某些目的蛋白吸附力弱有關(guān)），0.2M也能洗脫。所以降低上樣量為最大吸附的50%。但是0.4M的氯化鈉（以前是0.2M氯化鈉）才能洗脫出目的蛋白。這兩次的蛋白純化實(shí)驗(yàn)和以前的都有不同之處。 |
3樓2016-06-11 20:32:06
hc-material
專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
-
專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +702 - BioEPI: 1
- 應(yīng)助: 517 (博士)
- 金幣: 462.9
- 散金: 18028
- 紅花: 313
- 帖子: 3594
- 在線: 518.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 4027804
- 注冊(cè): 2015-08-18
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 核技術(shù)及其應(yīng)用
- 管轄: 生物科學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
你說(shuō)的應(yīng)該是DEAE Sepharose FF 介質(zhì)，什么PH要看你的目標(biāo)酶的穩(wěn)定性，最高活性PH，PI等，要大于你目標(biāo)酶的PI一個(gè)單位至少。層析過(guò)程：平衡，上樣，清洗，洗脫，不存在換PH的說(shuō)法，換也是換平衡緩沖液的PH，直接用新的緩沖液平衡就好，不用倒出來(lái)。 上柱70%還是50%的吸附量你如何確定的。上樣量越多殘留在介質(zhì)緩沖體積重的沒(méi)吸附的蛋白越多，所以低鹽能洗出來(lái)，上樣量小，緩沖體系殘留的蛋白越少，所以要增加鹽濃度洗脫出吸附量弱的蛋白。祝順利。 |
2樓2016-06-07 10:42:21
walking dead
金蟲(chóng) (小有名氣)
填料制備和蛋白純化專(zhuān)家
- 應(yīng)助: 40 (小學(xué)生)
- 貴賓: 0.001
- 金幣: 1354.8
- 散金: 59
- 紅花: 17
- 帖子: 287
- 在線: 56.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 4175016
- 注冊(cè): 2015-10-26
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
|
弱陰離子交換介質(zhì)，你要調(diào)換PH值，不用倒出來(lái)，你直接用你需要的PH緩沖液平衡8~10倍柱體積。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
4樓2016-06-15 17:12:54
zy晨曦
新蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 2258.4
- 散金: 10
- 紅花: 1
- 帖子: 205
- 在線: 77.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1755080
- 注冊(cè): 2012-04-14
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 微生物遺傳育種學(xué)
5樓2016-06-17 19:30:07
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600 一志愿9 總分351 求調(diào)劑學(xué)校 +6 | czhcz 2026-03-31 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 085602 307分 求調(diào)劑 +9 | 不知道叫什么！ 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
[考研] 生物學(xué)296求調(diào)劑 +8 | 湯圓包 2026-03-29 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +9 | 藍(lán)月亮亮 2026-03-30 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程調(diào)劑 +13 | 深V宿舍吧 2026-03-30 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 085601 329分調(diào)劑 +6 | yzsa12 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 不挑專(zhuān)業(yè) 求收留 +4 | Yam. 2026-03-30 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 本科211安全工程，初試290分，求調(diào)劑 +3 | 2719846834 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 262求調(diào)劑 +7 | ZZ..000 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工329分求調(diào)劑 +5 | 這是有太陽(yáng)哇 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0817化工學(xué)碩調(diào)劑 +7 | 努力上岸中！ 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 各位老師好，我的一志愿為北京科技大學(xué)085601材料專(zhuān)碩 +10 | Koxui 2026-03-28 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)/290求調(diào)劑/本科經(jīng)歷豐富/工科也可 +13 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +7 | A child 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +10 | jjjjjjjjjjl 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)求調(diào)劑 +4 | 起個(gè)名咋這么難 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑11408 +3 | 劉小鹿lu 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分，求調(diào)劑 +9 | 大饞小子 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑求收留 +7 | 果然有我 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 打過(guò)很多競(jìng)賽，085406控制工程300分，求調(diào)劑 +3 | askeladz 2026-03-26 | 3/150 |
|