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wenyi2015銀蟲 (正式寫手)
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真核表達(dá)載體和宿主如何選擇 已有2人參與
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如題 實(shí)驗室有CHO 293 HELA細(xì)胞 想表達(dá)重組蛋白 該如何選擇質(zhì)粒載體 請各位給些建議 @biostar2009 @飛約瘋?cè)嗽?/u> @wizardfan @youlinglyw 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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CHO細(xì)胞一般用于工業(yè)大中規(guī)模生產(chǎn)，需要專用的震蕩培養(yǎng)箱，條件需要摸索的比較多。 293細(xì)胞比較適合小量表達(dá)，做一些實(shí)驗什么的比較合適，但對于載體上有Sv40 Ori元件的，用293T會更好，表達(dá)水平會更高，同樣Cos-7細(xì)胞也是如此。 真核表達(dá)蛋白的話，一般都會加信號肽讓蛋白分泌出去，invitrogen 有個psectag系列載體，我們用的就是。 也可以普通的質(zhì)粒進(jìn)行加蛋白標(biāo)簽過表達(dá)，然后進(jìn)行純化。 |
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wenyi2015
4樓2016-08-01 10:43:15
wenyi2015
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7樓2016-08-02 15:45:24
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