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wenyi2015銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
真核表達(dá)載體和宿主如何選擇 已有2人參與
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如題 實(shí)驗(yàn)室有CHO 293 HELA細(xì)胞 想表達(dá)重組蛋白 該如何選擇質(zhì)粒載體 請各位給些建議 @biostar2009 @飛約瘋?cè)嗽?/u> @wizardfan @youlinglyw 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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siriusxuan
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-08-02 21:24:45
wenyi2015: 金幣+10, ★★★★★最佳答案 2016-08-05 08:11:58
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wenyi2015: 金幣+10, ★★★★★最佳答案 2016-08-05 08:11:58
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CHO細(xì)胞一般用于工業(yè)大中規(guī)模生產(chǎn)，需要專用的震蕩培養(yǎng)箱，條件需要摸索的比較多。 293細(xì)胞比較適合小量表達(dá)，做一些實(shí)驗(yàn)什么的比較合適，但對(duì)于載體上有Sv40 Ori元件的，用293T會(huì)更好，表達(dá)水平會(huì)更高，同樣Cos-7細(xì)胞也是如此。 真核表達(dá)蛋白的話，一般都會(huì)加信號(hào)肽讓蛋白分泌出去，invitrogen 有個(gè)psectag系列載體，我們用的就是。 也可以普通的質(zhì)粒進(jìn)行加蛋白標(biāo)簽過表達(dá)，然后進(jìn)行純化。 |
wenyi2015
4樓2016-08-01 10:43:15
科學(xué)球球
新蟲 (正式寫手)
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2樓2016-07-31 08:37:38
3樓2016-08-01 07:15:21
wenyi2015
銀蟲 (正式寫手)
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5樓2016-08-01 10:48:39
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