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18843419153新蟲 (初入文壇)
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[求助]
western blot問題求教 已有3人參與
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最近做植物western。前期的工作都不錯。轉(zhuǎn)膜是200MA 1.5小時 抗體是45kd的action。二抗是hrp的�？墒亲詈笥没瘜W(xué)發(fā)光成像儀看就是這樣的。很苦惱。求解釋�；蛘呖梢越o我一個做過的全步驟也好。 麻煩各位兄弟姐妹了 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2016-11-05 22:49:34
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2016-11-05 22:49:34
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我們用的濕轉(zhuǎn)300ma，50分鐘，是不是顯影液錯了，或者一抗二抗用錯了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-11-05 08:06:25
18843419153
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我用的是ecl化學(xué)發(fā)光。 試劑盒1:1配的 能看到marker是顯影液的事嗎？ 抗體選的是內(nèi)參蛋白抗體�？墒菦]做出來。 很郁悶。 天天查也沒有個所以然啊。 能不能是轉(zhuǎn)膜過了啊。 還有抗體稀釋液也沒有啥要求。 我一抗二抗用的是我們實(shí)驗室別人做組織免疫用的買的抗體稀釋液。這個問題大不大 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2016-11-05 09:01:04
田生帥菜
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4樓2016-11-05 22:32:23
田生帥菜
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5樓2016-11-05 22:32:52
18843419153
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6樓2016-11-06 08:55:51
田生帥菜
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【答案】應(yīng)助回帖
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我們用的是西格瑪?shù)囊豢�，一比一萬稀釋，紅外二抗。既然你用的是hrp，可以試試DAB顯色 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
7樓2016-11-06 09:51:50
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8樓2016-11-06 14:10:17
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9樓2016-11-06 14:10:51
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10樓2016-11-06 14:13:14
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