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jinshengfang木蟲(chóng) (正式寫手)
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[交流]
pET28a空質(zhì)粒雙酶切出現(xiàn)兩條帶 已有5人參與
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我的pET28a質(zhì)粒利用NdeI和XhoI雙酶切，出現(xiàn)兩條帶，這是怎么回事？ 第一是marker 5000bp 第二條帶 pET28a酶切前 第三 pET28a酶切后 上傳.png |
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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不知道為什么你的圖片看不了大圖，首先pET-28a是5.4kb，如果有大一點(diǎn)的marker，下次還是換一個(gè)大一點(diǎn)，10kb marker應(yīng)該很常見(jiàn)。然后，質(zhì)粒帶像酶切或的，未酶切的質(zhì)粒應(yīng)該是會(huì)出現(xiàn)三條帶。然后，這兩個(gè)酶切位點(diǎn)在多克隆位點(diǎn)兩端，會(huì)將多克隆位點(diǎn)切下，好像還會(huì)切下一條his尾巴，所以可能上面一條只有單切。NdeI的酶不知道你用的那個(gè)公司的，我一直感覺(jué)這個(gè)酶活性不是很高，建議實(shí)驗(yàn)時(shí)，先用NdeI單切，然后膠回收，然后再XhoI切，但這樣你出發(fā)的質(zhì)粒量要大一點(diǎn)。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
2樓2016-12-28 20:18:52
stevenshi021
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3樓2016-12-28 23:08:23
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binglanhuayu
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