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jinshengfang木蟲 (正式寫手)
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[交流]
pET28a空質(zhì)粒雙酶切出現(xiàn)兩條帶 已有5人參與
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我的pET28a質(zhì)粒利用NdeI和XhoI雙酶切，出現(xiàn)兩條帶，這是怎么回事？ 第一是marker 5000bp 第二條帶 pET28a酶切前 第三 pET28a酶切后 上傳.png |
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不知道為什么你的圖片看不了大圖，首先pET-28a是5.4kb，如果有大一點的marker，下次還是換一個大一點，10kb marker應(yīng)該很常見。然后，質(zhì)粒帶像酶切或的，未酶切的質(zhì)粒應(yīng)該是會出現(xiàn)三條帶。然后，這兩個酶切位點在多克隆位點兩端，會將多克隆位點切下，好像還會切下一條his尾巴，所以可能上面一條只有單切。NdeI的酶不知道你用的那個公司的，我一直感覺這個酶活性不是很高，建議實驗時，先用NdeI單切，然后膠回收，然后再XhoI切，但這樣你出發(fā)的質(zhì)粒量要大一點。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-12-28 20:18:52
stevenshi021
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3樓2016-12-28 23:08:23
4樓2016-12-29 10:39:42
5樓2016-12-29 15:54:27
6樓2016-12-30 08:56:25
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