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[求助]
關(guān)于pull down實驗，求大神進(jìn)來指導(dǎo)一下 已有2人參與
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| 最近做Pull down 實驗驗證酵母雙雜交篩選的結(jié)果，在酵母雙雜交實驗中，篩選到3個可能的互作蛋白，所以再做了pull down再進(jìn)行體外驗證，pull down 構(gòu)建目的蛋白表達(dá)時，試了很多的載體，后面只有pMAL-c2x這個載體在上清中表達(dá)我的目的蛋白，其他GST，HIS標(biāo)簽的pGEX6P-1等載體目的蛋白均在沉淀�，F(xiàn)在想進(jìn)行下一步實驗驗證酵母雙雜結(jié)果與目的蛋白在體外是否互作，請教各位我下一步是不是要構(gòu)建酵母雙雜交篩選蛋白的其他標(biāo)簽的蛋白載體？（是否只要能讓改蛋白表達(dá)就可以的標(biāo)簽載體？）然后過柱純化，掛柱，WB驗證？請做過的各位老師，同學(xué)指導(dǎo)一下，謝謝 |
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3樓2017-02-16 17:24:56
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