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[求助]
關于pull down實驗,求大神進來指導一下 已有2人參與
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| 最近做Pull down 實驗驗證酵母雙雜交篩選的結果,在酵母雙雜交實驗中,篩選到3個可能的互作蛋白,所以再做了pull down再進行體外驗證,pull down 構建目的蛋白表達時,試了很多的載體,后面只有pMAL-c2x這個載體在上清中表達我的目的蛋白,其他GST,HIS標簽的pGEX6P-1等載體目的蛋白均在沉淀。現(xiàn)在想進行下一步實驗驗證酵母雙雜結果與目的蛋白在體外是否互作,請教各位我下一步是不是要構建酵母雙雜交篩選蛋白的其他標簽的蛋白載體?(是否只要能讓改蛋白表達就可以的標簽載體?)然后過柱純化,掛柱,WB驗證?請做過的各位老師,同學指導一下,謝謝 |
至尊木蟲 (文壇精英)
銀蟲 (小有名氣)

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材料學碩,求調劑
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學校已經提交到NSFC,還能修改嗎?
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