 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2029 | 回復(fù): 11 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
cherry_cao新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
重組質(zhì)粒雙酶切切不出片段 已有2人參與
|
|
|
在構(gòu)建一個(gè)重組質(zhì)粒，載體再加上一個(gè)啟動(dòng)子（259bp），酶切用的是TAKARA 的Q.Cut Hind Ⅲ、PstⅠ，載體上有g(shù)fp基因片段，所以轉(zhuǎn)化子可以表現(xiàn)熒光檢測(cè)。 我挑取了發(fā)熒光的轉(zhuǎn)化子，提質(zhì)粒，酶切，但是沒(méi)有切出來(lái)是怎么回事？  調(diào)過(guò)曝光還是看不見(jiàn)。 電泳圖左→右，Marker 1kb Plus、plasmid、酶切1、酶切2、Marker DL 2000 酶切.png |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有228人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- Bgl2和Hind3雙酶切切不開(kāi)
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒雙酶切
已經(jīng)有7人回復(fù)
小冀-
版主 (著名寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 713 (博后)
- 貴賓: 3.033
- 金幣: 11446.9
- 散金: 1055
- 紅花: 82
- 帖子: 2509
- 在線: 445.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1521695
- 注冊(cè): 2011-12-03
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物信息學(xué)
- 管轄: 微生物
9樓2017-03-11 23:29:38
小冀-
版主 (著名寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 713 (博后)
- 貴賓: 3.033
- 金幣: 11446.9
- 散金: 1055
- 紅花: 82
- 帖子: 2509
- 在線: 445.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1521695
- 注冊(cè): 2011-12-03
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物信息學(xué)
- 管轄: 微生物
2樓2017-03-11 12:25:06
原海亮
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 232 (大學(xué)生)
- 金幣: 4607.4
- 散金: 3521
- 紅花: 33
- 帖子: 1804
- 在線: 375.4小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1392705
- 注冊(cè): 2011-09-06
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門(mén)吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-03-12 08:52:27
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門(mén)吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-03-12 08:52:27
|
你這是marker加多了還是曝光度沒(méi)有調(diào)好額，條帶都看不清楚，你這個(gè)載體空載的時(shí)候，gfp前面有啟動(dòng)子么？還是是專(zhuān)門(mén)檢測(cè)啟動(dòng)子的載體？可以重新做個(gè)酶切降低些質(zhì)粒量，或者再選擇其他的酶試試。另外可以用啟動(dòng)子的特異性引物或者通用引物，用質(zhì)粒做模板做個(gè)PCR驗(yàn)證看看。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
3樓2017-03-11 22:29:27
cherry_cao
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 97
- 散金: 11
- 帖子: 17
- 在線: 4.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 5429110
- 注冊(cè): 2017-01-01
|
是曝光度大，為了找小片段； 空載體做了陽(yáng)性對(duì)照并不會(huì)產(chǎn)生GFP，所以應(yīng)該是沒(méi)有自身攜帶啟動(dòng)子； 很尷尬的是啟動(dòng)子前面只有一個(gè)酶切位點(diǎn)Hind3，所以要換兩種酶這個(gè)想法做不了； PCR的結(jié)果是有目的條帶的T^T 我現(xiàn)在只能想是酶切位點(diǎn)變異，先去測(cè)序看看了 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶(hù)端 |
4樓2017-03-11 23:18:49
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料學(xué)碩333求調(diào)劑 +7 | 北道巷 2026-03-24 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703化學(xué)338求調(diào)劑！ +5 | Zuhui0306 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +7 | prayer13 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿211院校 344分 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生物學(xué)學(xué)碩，求調(diào)劑 +3 | 丶風(fēng)雪夜歸人丶 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料考研求調(diào)劑 +3 | Dendel 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 085602 289分求調(diào)劑
+8
|
WWW西西弗斯 2026-03-24 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 22 350 本科985求調(diào)劑，求老登收留 +4 | 李軼男003 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程 317求調(diào)劑 +4 | JKSOIID 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 324 +4 | Promise-jyl 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
材料學(xué)碩，求調(diào)劑
 6+4
|
糖葫蘆888ll 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 化工專(zhuān)碩求調(diào)劑 +3 | question挽風(fēng) 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 研研，接電話 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 26申博自薦 +3 | whh869393 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)一志愿985，分?jǐn)?shù)349求調(diào)劑 +6 | zxts12 2026-03-21 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿海大，0703化學(xué)學(xué)碩304分，有大創(chuàng)項(xiàng)目，四級(jí)已過(guò) +6 | 幸運(yùn)哩哩 2026-03-22 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4 | 妮妮ninicgb 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +3 | 喜歡還是不甘心 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)297求調(diào)劑 +3 | Daisy☆ 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 南昌大學(xué)材料專(zhuān)碩311分求調(diào)劑 +6 | 77chaselx 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | @taotao 2026-03-20 | 3/150 |
|