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南方丙丁銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
凝膠柱分離順序問(wèn)題 已有1人參與
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| 蛋白分離純化最后一步，打算用凝膠柱，手上有兩個(gè)規(guī)格的柱子，一個(gè)分離范圍在3000-70000，另一個(gè)在10000-600000，目標(biāo)蛋白30000左右。想串聯(lián)進(jìn)行分離，我是先用分離范圍在3000-70000，再用10000-600000呢？還是顛倒過(guò)來(lái)？求助啊，謝謝了~ |
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2樓2017-04-15 19:54:38
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| 從這兩種填料的分離范圍來(lái)看應(yīng)該是GE的Superdex 75 (3kDa-70kDa)和Superdex 200 (10kDa-600kDa)，對(duì)于目標(biāo)分子量在30kDa的蛋白而言，這兩種填料都適合。但是具體還要根據(jù)分離的目的來(lái)定，Superdex 75對(duì)于17-44kDa分子量范圍的蛋白具有更高的分辨率，而Superdex 200對(duì)于150kDa以上分子量的大蛋白分離度更高，所以如果是要去除蛋白二聚體或多聚體，那么應(yīng)該選擇Superdex 75；如果是需要置換緩沖液或脫鹽，那么應(yīng)該選擇分離范圍在更低分子量的填料，比如Sephadex G10、G25等產(chǎn)品。 |
3樓2017-05-10 09:44:38
walking dead
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4樓2017-08-02 11:22:54
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