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南方丙丁銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
凝膠柱分離順序問題 已有1人參與
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| 蛋白分離純化最后一步，打算用凝膠柱，手上有兩個規(guī)格的柱子，一個分離范圍在3000-70000，另一個在10000-600000，目標(biāo)蛋白30000左右。想串聯(lián)進(jìn)行分離，我是先用分離范圍在3000-70000，再用10000-600000呢？還是顛倒過來？求助啊，謝謝了~ |
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金蟲 (小有名氣)
填料制備和蛋白純化專家
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- 專業(yè): 生物化學(xué)
4樓2017-08-02 11:22:54
xiaoLifeiD
至尊木蟲 (知名作家)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
南方丙丁: 金幣+5 2017-04-18 09:27:29
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先大后小，看上限，over 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2017-04-15 19:54:38
ChemBeanGo
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
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- 注冊: 2016-04-26
- 專業(yè): 有機合成
| 從這兩種填料的分離范圍來看應(yīng)該是GE的Superdex 75 (3kDa-70kDa)和Superdex 200 (10kDa-600kDa)，對于目標(biāo)分子量在30kDa的蛋白而言，這兩種填料都適合。但是具體還要根據(jù)分離的目的來定，Superdex 75對于17-44kDa分子量范圍的蛋白具有更高的分辨率，而Superdex 200對于150kDa以上分子量的大蛋白分離度更高，所以如果是要去除蛋白二聚體或多聚體，那么應(yīng)該選擇Superdex 75；如果是需要置換緩沖液或脫鹽，那么應(yīng)該選擇分離范圍在更低分子量的填料，比如Sephadex G10、G25等產(chǎn)品。 |
3樓2017-05-10 09:44:38
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