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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 核酸提取 » 質粒轉化實驗
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Zhibao1994新蟲 (小有名氣)
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[求助]
質粒轉化實驗 已有2人參與
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向各位請教下關于DNA質粒轉化實驗。我最近在做質粒轉化實驗，將老師合成的質粒轉入農桿菌中。第一步是將細胞從零下八十攝氏度中取出放入冰盒中半個小時，同時預冷兩個1.5ml的離心管，待細胞融化后，將細胞分裝于兩個離心管（離心管已標注轉化的質粒名稱），各100ul,第二步：加入2ul的質粒，在冰上30分鐘。熱擊（42度，45秒)，然后冰上放2分鐘。第三步：加入SOC 0.9ml，然后在37度中培養(yǎng)一個小時，離心10分鐘，4000轉每分鐘。涂板（Kan，LB），37度培養(yǎng)隔夜觀察。老是只能看到幾個菌落。 @biostar2009 @youlinglyw 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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Romanticman
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Zhibao1994
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4樓2017-05-10 06:27:37
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