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Zhibao1994新蟲 (小有名氣)
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[求助]
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) 已有2人參與
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向各位請教下關(guān)于DNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。我最近在做質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),將老師合成的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌中。第一步是將細(xì)胞從零下八十?dāng)z氏度中取出放入冰盒中半個(gè)小時(shí),同時(shí)預(yù)冷兩個(gè)1.5ml的離心管,待細(xì)胞融化后,將細(xì)胞分裝于兩個(gè)離心管(離心管已標(biāo)注轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒名稱),各100ul,第二步:加入2ul的質(zhì)粒,在冰上30分鐘。熱擊(42度,45秒),然后冰上放2分鐘。第三步:加入SOC 0.9ml,然后在37度中培養(yǎng)一個(gè)小時(shí),離心10分鐘,4000轉(zhuǎn)每分鐘。涂板(Kan,LB),37度培養(yǎng)隔夜觀察。老是只能看到幾個(gè)菌落。 @biostar2009 @youlinglyw 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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