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Zhibao1994新蟲 (小有名氣)
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質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實驗 已有2人參與
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向各位請教下關(guān)于DNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實驗。我最近在做質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實驗,將老師合成的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌中。第一步是將細胞從零下八十攝氏度中取出放入冰盒中半個小時,同時預(yù)冷兩個1.5ml的離心管,待細胞融化后,將細胞分裝于兩個離心管(離心管已標注轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒名稱),各100ul,第二步:加入2ul的質(zhì)粒,在冰上30分鐘。熱擊(42度,45秒),然后冰上放2分鐘。第三步:加入SOC 0.9ml,然后在37度中培養(yǎng)一個小時,離心10分鐘,4000轉(zhuǎn)每分鐘。涂板(Kan,LB),37度培養(yǎng)隔夜觀察。老是只能看到幾個菌落。 @biostar2009 @youlinglyw 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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