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Zhibao1994新蟲 (小有名氣)
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[求助]
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) 已有2人參與
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向各位請教下關(guān)于DNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。我最近在做質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，將老師合成的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌中。第一步是將細(xì)胞從零下八十?dāng)z氏度中取出放入冰盒中半個(gè)小時(shí)，同時(shí)預(yù)冷兩個(gè)1.5ml的離心管，待細(xì)胞融化后，將細(xì)胞分裝于兩個(gè)離心管（離心管已標(biāo)注轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒名稱），各100ul,第二步：加入2ul的質(zhì)粒，在冰上30分鐘。熱擊（42度，45秒)，然后冰上放2分鐘。第三步：加入SOC 0.9ml，然后在37度中培養(yǎng)一個(gè)小時(shí)，離心10分鐘，4000轉(zhuǎn)每分鐘。涂板（Kan，LB），37度培養(yǎng)隔夜觀察。老是只能看到幾個(gè)菌落。 @biostar2009 @youlinglyw 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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Zhibao1994
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昨天14日看了下11日做的菌，居然長滿了培養(yǎng)皿，不清楚怎么回事兒。老師以前做的菌隔夜就能出來，為啥DH5a在kan培養(yǎng)基里長這么慢呢！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
22樓2017-05-15 10:55:28
2樓2017-05-09 15:10:52
風(fēng)霜非暖
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3樓2017-05-09 23:02:20
Zhibao1994
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4樓2017-05-10 06:27:37
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