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yandalan新蟲 (初入文壇)
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[交流]
關(guān)于Western blot背景太臟的問題 已有7人參與
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組織蛋白,總上樣量為40ug,用10%的膠,60v電泳濃縮膠,80v電泳分離膠,200mA轉(zhuǎn)膜2小時,之后5%脫脂奶粉封閉2小時,一抗以一抗稀釋液1:1000稀釋,因為沒有4℃冰柜,以前都是一抗在垂直混懸儀孵育過夜,第二天以1XTBST洗條帶5min6次,二抗1:2000孵育2小時,1XTBST洗帶條5min6次后用高敏曝光劑曝光,如下圖,之后改變了很多次條件,包括一抗敷育時間減少到常溫4小時,稀釋一抗至1:10000,二抗稀釋至1:10000等,結(jié)果都是一樣,求助!萬分感謝! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
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