 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 9721 | 回復: 6 | ||
洋小妞baby新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
熒光定量PCR加入的模板量應該是多少 已有1人參與
|
|
想請教一下各位大神做熒光定量PCR反應實驗時，按照說明書，反應體系是20微升，加入的模板量應該是多少合適呢？用內參基因actin還有其他的幾個基因做了一下實驗，actin基因的CT值在21左右，其他的幾個基因的CT值也在20-25附近？ 是根據(jù)CT值大小來決定模板用量吧？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經有161人回復
-
蛋白質檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經有0人回復
-
納米粒度分析
已經有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經有0人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 【分享】熒光定量PCR實驗指南（一）
已經有20人回復
- 【專題】PCR實驗技術指南
已經有535人回復
|
本帖內容被屏蔽 |
2樓2017-08-11 20:28:13
【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數(shù) +1
|
假如模板分子有一個，那么經過一輪PCR，就變成2個，這兩個經過又一輪PCR，變成了4個，依次……，發(fā)現(xiàn)經過40輪，變成了2的40次方個，伴隨著每輪PCR有熒光探針的水解，根據(jù)熒光情況判斷原始產量，推算初始模板量。 我們實驗室一般是用500-1000ngRNA做RT，然后得到20μlcDNA，加入85μl H2O，等于總體積是105μl, 每次做qPCR的時候總體積是25μl: 12.5μl SYBR Green Taq 2x +6.5μl H2O + 0.5μl primer1 10μM +0.5μl primer2 10μM + 5μl cDNA 反正這個條件下我們的qPCR都能做出來，你可以做個參考 |
3樓2017-08-11 21:14:52
洋小妞baby
新蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 257.3
- 散金: 10
- 帖子: 48
- 在線: 12.4小時
- 蟲號: 4392005
- 注冊: 2016-02-02
- 專業(yè): 基因組學
|
好羨慕你們都說我們實驗室啊，嗚嗚嗚，研究生還沒入學，被老師逼著做實驗，實驗室之前只有一個博士師姐做分子方向，然而她已經畢業(yè)了。我還想問一下每個重復孔的CT值的標準偏差多少合適呢 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2017-08-11 23:08:11
洋小妞baby
新蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 257.3
- 散金: 10
- 帖子: 48
- 在線: 12.4小時
- 蟲號: 4392005
- 注冊: 2016-02-02
- 專業(yè): 基因組學
5樓2017-08-11 23:08:55
zht930528
木蟲 (正式寫手)
麻辣王子
- 應助: 7 (幼兒園)
- 金幣: 2848.9
- 散金: 61
- 紅花: 1
- 帖子: 333
- 在線: 78.2小時
- 蟲號: 3181724
- 注冊: 2014-05-05
- 專業(yè): 微生物學
6樓2017-08-16 11:03:01
45racegirl
新蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 82.9
- 散金: 25
- 帖子: 42
- 在線: 5.3小時
- 蟲號: 6470178
- 注冊: 2017-05-07
- 專業(yè): 生理生態(tài)學
7樓2017-10-31 17:14:21
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 洋小妞baby 的主題更新
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703化學求調劑 +4 | 奶油草莓. 2026-03-22 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 一志愿陜師大生物學071000，298分，求調劑 +3 | SYA！ 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 招08考數(shù)學 +6 | laoshidan 2026-03-20 | 14/700 |
|
|
[考研] 307求調劑 +3 | 余意卿 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 一志愿東華大學化學070300，求調劑
+7
|
2117205181 2026-03-21 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 280分求調劑 一志愿085802 +4 | PUMPT 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿中南化學（0703）總分337求調劑 +9 | niko- 2026-03-19 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學 ，070300化學學碩，總分287，雙非一本，求調劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 275求調劑 +6 | shansx 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 考研調劑 +4 | 來好運來來來 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 285求調劑 +6 | ytter 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 336求調劑 +5 | rmc8866 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 301求調劑 +10 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 求調劑 +3 | Ma_xt 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中海洋材料工程專碩330分求調劑 +8 | 小材化本科 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調劑一志愿南京航空航天大學289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 353求調劑 +3 | 拉鉤不許變 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科鄭州大學物理學院，一志愿華科070200學碩，346求調劑 +4 | 我不是一根蔥 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 收復試調劑生 +4 | 雨后秋荷 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調劑南林，給自己招師弟中～ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|