 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 9747 | 回復(fù): 6 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
洋小妞baby新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
熒光定量PCR加入的模板量應(yīng)該是多少 已有1人參與
|
||
|
想請(qǐng)教一下各位大神做熒光定量PCR反應(yīng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，按照說(shuō)明書，反應(yīng)體系是20微升，加入的模板量應(yīng)該是多少合適呢？用內(nèi)參基因actin還有其他的幾個(gè)基因做了一下實(shí)驗(yàn)，actin基因的CT值在21左右，其他的幾個(gè)基因的CT值也在20-25附近？ 是根據(jù)CT值大小來(lái)決定模板用量吧？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有184人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
天津商業(yè)大學(xué) 生物與醫(yī)藥課題組招生
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
生物化工學(xué)碩招收調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 【分享】熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)指南（一）
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【專題】PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)指南
已經(jīng)有535人回復(fù)
45racegirl
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 82.9
- 散金: 25
- 帖子: 42
- 在線: 5.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 6470178
- 注冊(cè): 2017-05-07
- 專業(yè): 生理生態(tài)學(xué)
|
樓主，想問一下，我內(nèi)參的ct值都到35了，其他目的基因的ct值在21左右是正常的，內(nèi)參基因是人家做同種物種用的，很郁悶 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2017-10-31 17:14:21
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
2樓2017-08-11 20:28:13
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
假如模板分子有一個(gè)，那么經(jīng)過一輪PCR，就變成2個(gè)，這兩個(gè)經(jīng)過又一輪PCR，變成了4個(gè)，依次……，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過40輪，變成了2的40次方個(gè)，伴隨著每輪PCR有熒光探針的水解，根據(jù)熒光情況判斷原始產(chǎn)量，推算初始模板量。 我們實(shí)驗(yàn)室一般是用500-1000ngRNA做RT，然后得到20μlcDNA，加入85μl H2O，等于總體積是105μl, 每次做qPCR的時(shí)候總體積是25μl: 12.5μl SYBR Green Taq 2x +6.5μl H2O + 0.5μl primer1 10μM +0.5μl primer2 10μM + 5μl cDNA 反正這個(gè)條件下我們的qPCR都能做出來(lái)，你可以做個(gè)參考 |
3樓2017-08-11 21:14:52
洋小妞baby
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 257.3
- 散金: 10
- 帖子: 48
- 在線: 12.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 4392005
- 注冊(cè): 2016-02-02
- 專業(yè): 基因組學(xué)
|
好羨慕你們都說(shuō)我們實(shí)驗(yàn)室啊，嗚嗚嗚，研究生還沒入學(xué)，被老師逼著做實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)室之前只有一個(gè)博士師姐做分子方向，然而她已經(jīng)畢業(yè)了。我還想問一下每個(gè)重復(fù)孔的CT值的標(biāo)準(zhǔn)偏差多少合適呢 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2017-08-11 23:08:11
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 309求調(diào)劑 +8 | 呆菇不是戴夫 2026-04-02 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 總分328生物與醫(yī)藥考數(shù)學(xué)求調(diào)劑 +3 | aaadim 2026-04-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +13 | jjjjjjjjjjl 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京理工大學(xué)本科211材料工程294求調(diào)劑 +8 | mikasa的圍巾 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085601 材料工程 313分 求調(diào)劑 +7 | Ong3 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +23 | 新時(shí)代材料 2026-03-27 | 26/1300 |
|
|
|
[考研] 材料考研調(diào)劑 +9 | Gs大王 2026-04-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑0702 +3 | 梅子味晚霞 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +4 | 學(xué)員97LZgn 2026-04-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)324求調(diào)劑 +12 | hanamiko 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 食品學(xué)碩362求調(diào)劑 +3 | xuanxianxian 2026-04-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工調(diào)劑一志愿大連海事085600，349 +9 | 吃的不少 2026-03-30 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿華南師范361分，化學(xué)求調(diào)劑 +4 | Nicole88888 2026-04-01 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 353求調(diào)劑 +3 | 江上楓_26 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科211安全工程，初試290分，求調(diào)劑 +3 | 2719846834 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué) +20 | 妮妮ninicgb 2026-03-27 | 20/1000 |
|
|
|
[考研] 食品工程專碩一志愿中海洋309求調(diào)劑 +5 | 小張zxy張 2026-03-26 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 085602化工求調(diào)劑（331分） +8 | 111@127 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑（080500） +14 | A child 2026-03-27 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +3 | A child 2026-03-28 | 3/150 |
|