 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 416 | 回復(fù): 3 | |||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者無學(xué)論hh將贈(zèng)送您 5 個(gè)金幣 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
無學(xué)論hh新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
純化，異源表達(dá) 已有1人參與
|
||
|
我是做酶的，我在異源表達(dá)好后，培養(yǎng)破碎得到粗酶液，檢測有活性，但是在做鎳柱純化時(shí)，感覺蛋白不掛柱子，我是在蛋白質(zhì)雙端都加上了6xhis標(biāo)簽，求大神們，幫忙解答一下，該怎么做。 @天使托 發(fā)自小木蟲手機(jī)客戶端 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
336求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
286求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿華中科技大學(xué)071000，求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
279分求調(diào)劑 一志愿211
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
332求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
0856材料專碩353求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
材料學(xué)學(xué)碩080502 337求調(diào)劑-一志愿華中科技大學(xué)
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
085601調(diào)劑 358分
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
0856 271求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名
已經(jīng)有15人回復(fù)
無學(xué)論hh
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 33
- 帖子: 16
- 在線: 29分鐘
- 蟲號(hào): 34451639
- 注冊: 2024-01-21
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
|
謝謝，這個(gè)是可溶性蛋白，我每次都是破碎得到粗酶液，然后12000rpm離心20min后去檢測上清液的酶活的，有酶活后再去做的純化，純化時(shí)反復(fù)用粗酶液過柱子3-4遍，然后先用40mM的咪唑溶液洗去雜蛋白，100-500mM咪唑溶液探究目的蛋白洗脫濃度，用蛋白質(zhì)定量試劑G250實(shí)時(shí)檢測洗脫液中蛋白濃度，但是做了幾次都是40mM就洗出來了大部分蛋白，然后100mM洗出一點(diǎn)，200-500逐漸減少了，每個(gè)濃度洗脫液都用了四杯柱，用底物檢測酶活時(shí)，過柱子剩下的粗酶液中酶活最高，40mM咪唑溶液中酶活較高，100-500與前者比斷檔級降低。 發(fā)自小木蟲手機(jī)客戶端 |
3樓2026-01-20 16:23:00
隱約
鐵蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 14 (小學(xué)生)
- 金幣: 3133.6
- 紅花: 1
- 帖子: 571
- 在線: 195.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 1966644
- 注冊: 2012-08-31
- 專業(yè): 系統(tǒng)生物學(xué)
2樓2026-01-20 13:57:09
無學(xué)論hh
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 33
- 帖子: 16
- 在線: 29分鐘
- 蟲號(hào): 34451639
- 注冊: 2024-01-21
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
|
蛋白膠我正在做，等出來再看看結(jié)果，其實(shí)有人推薦我用MBP大標(biāo)簽，但是這個(gè)標(biāo)簽可能會(huì)影響酶的空間結(jié)構(gòu)進(jìn)而影響酶活，最主要的是這個(gè)表簽需要切除，酶切反應(yīng)要過夜，所以無法第一時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，一直在考慮要不要用，想問一下大家還有沒有什么好的方法。  發(fā)自小木蟲手機(jī)客戶端 |
4樓2026-01-20 16:26:54
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專業(yè)（081702）315分求調(diào)劑 +12 | yangfz 2026-03-17 | 12/600 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | wyyyqx 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +6 | △小透明* 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 280求調(diào)劑 +7 | 咕嚕曉曉 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
[考研] 324分 085600材料化工求調(diào)劑 +4 | llllkkkhh 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 354求調(diào)劑 +5 | Tyoumou 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +9 | 何潤采123 2026-03-18 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿中海洋材料工程專碩330分求調(diào)劑 +8 | 小材化本科 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 323求調(diào)劑 +3 | 洼小桶 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇州大學(xué)材料求調(diào)劑，總分315（英一） +5 | sbdksD 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中農(nóng)業(yè)071010，總分320求調(diào)劑 +3 | 困困困困坤坤 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 319求調(diào)劑 +3 | 小力氣珂珂 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 086500 325 求調(diào)劑 +3 | 領(lǐng)帶小熊 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +7 | 困于星晨 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)調(diào)劑招人�。�！ +3 | 山海天嵐 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 梁成偉老師課題組歡迎你的加入 +9 | 一鴨鴨喲 2026-03-14 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 324分 +10 | llllkkkhh 2026-03-18 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +4 | A_JiXing 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +5 | 大米飯！ 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070305求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-14 | 4/200 |
|