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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 材料區(qū) » 生物材料 » 天然生物材料 » 【求助】EDAC反應實驗操作問題
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cloudy3197銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助】EDAC反應實驗操作問題 已有2人參與
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初做合成，向各位請教一下： EDAC（跟EDC差不多是吧？）在反應時候，是不是應該先把反應液（我的反應體系，接近1%的HCl）ph調整一下（ph=5?）然后再將EDAC加入？還是加完再調也沒事兒？ 那是以什么形式加到溶液里的呢？直接把固體粉末加進去還是把EDAC溶于什么再滴加進去？？ 還有，加樣的順序是什么？氨基組分是在1%HCl中，是先向其中加羧基組分，然后EDAC；還是反過來？？ EDAC不是在水溶液中不穩(wěn)定么，那加多少的量合適？這東西能堅持3h不��？ 呵呵，多謝～～  [ Last edited by cloudy3197 on 2010-1-18 at 20:41 ] |
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 羧基活化EDC,NHS |
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cloudy3197
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3樓2010-01-18 22:15:04
qingbo62
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1、EDAC和EDC好像是同一個東西，不是差不多。 2、pH=5最好用緩沖溶液來調，MES。 如果不能用緩沖溶液，就先調好，再加，不然調來調去的就分解了。畢竟EDC用量少，對pH影響小。 3、EDC是活化COOH的，所以理論上講應該是先和COOH組分混合，反應10-15min后再加入NH2組分。如果你的體系簡單，可以一起加（A分子含COOH，B分子含NH2），如果是蛋白或者氨基酸的反應，有副反應的，最好先和COOH組分反應。 4、EDC反應的中間產物不穩(wěn)定，最好用sulfo-NHS活化，經典組合。NHS據(jù)說水溶性不好。 5、如果沒有sulfo-NHS，文獻上也有用NHS在水里面做的，我沒做過，不知是否可靠。不過有替代方法，就是COOH在有機溶劑中DCC催化和NHS先反應，純化后水溶液直接和NH2反應。不需要EDC了。 6、EDC可以配成溶液，也可以粉末直接加，就怕你秤不準。 |
2樓2010-01-18 21:25:18
cloudy3197
銀蟲 (小有名氣)
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4樓2010-01-18 22:59:47
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cloudy3197(金幣+5):多謝～～ 2010-01-28 00:01
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不知道你的問題解決了沒有，我做實驗用過EDC。 為了提高 酰胺鍵的 轉化率 EDC 一定要過量，過量到什么程度，好像沒有你說的1000：1那么高的，我看過幾篇文獻里用到EDC的 36：1是最大的，用量少的 1.2：1，但是用量少的一般都是和NHS一起用的，而且是在 ph 5 左右的緩沖溶液里。 如果你的反應物都溶于水，建議用 EDC,NHS in MES buffer ph-5.2~5.5，如果你的反應物有不溶于水的，只能用有機溶劑作為反應介質，建議你只用EDC 試一試，最好不要用DCC，因為副產物真地很難除凈，如果實在沒辦法了，再用DCC,NHS 試試吧。 [ Last edited by kong0908 on 2010-1-28 at 10:29 ] |
5樓2010-01-27 21:35:07
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