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cloudy3197銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助】EDAC反應(yīng)實(shí)驗(yàn)操作問題 已有2人參與
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初做合成，向各位請(qǐng)教一下： EDAC（跟EDC差不多是吧？）在反應(yīng)時(shí)候，是不是應(yīng)該先把反應(yīng)液（我的反應(yīng)體系，接近1%的HCl）ph調(diào)整一下（ph=5?）然后再將EDAC加入？還是加完再調(diào)也沒事兒？ 那是以什么形式加到溶液里的呢？直接把固體粉末加進(jìn)去還是把EDAC溶于什么再滴加進(jìn)去？？ 還有，加樣的順序是什么？氨基組分是在1%HCl中，是先向其中加羧基組分，然后EDAC；還是反過來？？ EDAC不是在水溶液中不穩(wěn)定么，那加多少的量合適？這東西能堅(jiān)持3h不啊？ 呵呵，多謝～～  [ Last edited by cloudy3197 on 2010-1-18 at 20:41 ] |
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 羧基活化EDC,NHS |
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cloudy3197
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4樓2010-01-18 22:59:47
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1、EDAC和EDC好像是同一個(gè)東西，不是差不多。 2、pH=5最好用緩沖溶液來調(diào)，MES。 如果不能用緩沖溶液，就先調(diào)好，再加，不然調(diào)來調(diào)去的就分解了。畢竟EDC用量少，對(duì)pH影響小。 3、EDC是活化COOH的，所以理論上講應(yīng)該是先和COOH組分混合，反應(yīng)10-15min后再加入NH2組分。如果你的體系簡(jiǎn)單，可以一起加（A分子含COOH，B分子含NH2），如果是蛋白或者氨基酸的反應(yīng)，有副反應(yīng)的，最好先和COOH組分反應(yīng)。 4、EDC反應(yīng)的中間產(chǎn)物不穩(wěn)定，最好用sulfo-NHS活化，經(jīng)典組合。NHS據(jù)說水溶性不好。 5、如果沒有sulfo-NHS，文獻(xiàn)上也有用NHS在水里面做的，我沒做過，不知是否可靠。不過有替代方法，就是COOH在有機(jī)溶劑中DCC催化和NHS先反應(yīng)，純化后水溶液直接和NH2反應(yīng)。不需要EDC了。 6、EDC可以配成溶液，也可以粉末直接加，就怕你秤不準(zhǔn)。 |
2樓2010-01-18 21:25:18
cloudy3197
銀蟲 (小有名氣)
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3樓2010-01-18 22:15:04
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不知道你的問題解決了沒有，我做實(shí)驗(yàn)用過EDC。 為了提高 酰胺鍵的 轉(zhuǎn)化率 EDC 一定要過量，過量到什么程度，好像沒有你說的1000：1那么高的，我看過幾篇文獻(xiàn)里用到EDC的 36：1是最大的，用量少的 1.2：1，但是用量少的一般都是和NHS一起用的，而且是在 ph 5 左右的緩沖溶液里。 如果你的反應(yīng)物都溶于水，建議用 EDC,NHS in MES buffer ph-5.2~5.5，如果你的反應(yīng)物有不溶于水的，只能用有機(jī)溶劑作為反應(yīng)介質(zhì)，建議你只用EDC 試一試，最好不要用DCC，因?yàn)楦碑a(chǎn)物真地很難除凈，如果實(shí)在沒辦法了，再用DCC,NHS 試試吧。 [ Last edited by kong0908 on 2010-1-28 at 10:29 ] |
5樓2010-01-27 21:35:07
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