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yangjunzju木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助/交流】IPTG含量 已有4人參與
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各位蟲友: 請教一個(gè)問題,我們做蛋白誘導(dǎo)表達(dá)時(shí)經(jīng)常要用到IPTG誘導(dǎo),但是當(dāng)加入一定量的IPTG后,經(jīng)過一段時(shí)間后我想知道IPTG是否會(huì)被菌體降解。如何確定IPTG在菌液中的含量呢?非常感謝 |
木蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
金蟲 (正式寫手)

木蟲 (著名寫手)
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肯定不會(huì)被降解。否則就不會(huì)選擇IPTG作為誘導(dǎo)劑了。 我推薦樓主看下下面這個(gè)文獻(xiàn):是關(guān)于自誘導(dǎo)培養(yǎng)的。解決了本底表達(dá)的問題,表達(dá)量可以比IPTG誘導(dǎo)提高好幾倍。主要改良的就是培養(yǎng)基,用這個(gè)培養(yǎng)基,就不需要在中途測OD,加誘導(dǎo)劑了。整個(gè)表達(dá)一步完成。好像也可以不加抗生素。作者是pET系統(tǒng)的發(fā)明者studier。 我自己做過,效果很好。有問題歡迎交流。 |

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