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[求助]
T7載體的IPTG誘導(dǎo)
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大家好！ 我在做基因克隆，載體用的是T7載體，由于克隆的基因較多，所以蛋白誘導(dǎo)方面比較麻煩�？赡苊總�基因所表達(dá)蛋白的條件都不一樣，我現(xiàn)在想粗略的看一下誘導(dǎo)時(shí)間和溫度以及誘導(dǎo)劑添加量對誘導(dǎo)的影響，我用的誘導(dǎo)劑是IPTG。我想請教一下一般IPTG在溫度，時(shí)間，用量上有沒有通用的范圍或規(guī)則？我有看過文獻(xiàn)報(bào)道，說T7載體用IPTG誘導(dǎo)會容易形成包涵體。 而且我現(xiàn)在是粗略的誘導(dǎo)檢測有無蛋白表達(dá)，所以并沒有在OD=0.6-0.8時(shí)誘導(dǎo)，而且誘導(dǎo)一般是過夜誘的，誘導(dǎo)溫度20℃，不知會否對這種載體的誘導(dǎo)有影響？ 我的宿主細(xì)胞是BL21. 請同行高手給與指教！ |
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2樓2012-02-23 20:33:17
3樓2012-02-23 21:16:44
lxj341401
至尊木蟲 (著名寫手)
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zhiqiang5070
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6樓2012-02-24 09:43:40
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weilson
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10樓2012-06-28 09:21:00
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