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[求助]
T7載體的IPTG誘導
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大家好! 我在做基因克隆,載體用的是T7載體,由于克隆的基因較多,所以蛋白誘導方面比較麻煩。可能每個基因所表達蛋白的條件都不一樣,我現(xiàn)在想粗略的看一下誘導時間和溫度以及誘導劑添加量對誘導的影響,我用的誘導劑是IPTG。我想請教一下一般IPTG在溫度,時間,用量上有沒有通用的范圍或規(guī)則?我有看過文獻報道,說T7載體用IPTG誘導會容易形成包涵體。 而且我現(xiàn)在是粗略的誘導檢測有無蛋白表達,所以并沒有在OD=0.6-0.8時誘導,而且誘導一般是過夜誘的,誘導溫度20℃,不知會否對這種載體的誘導有影響? 我的宿主細胞是BL21. 請同行高手給與指教! |
至尊木蟲 (著名寫手)
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