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T7載體的IPTG誘導(dǎo)
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大家好！ 我在做基因克隆，載體用的是T7載體，由于克隆的基因較多，所以蛋白誘導(dǎo)方面比較麻煩�？赡苊總�基因所表達(dá)蛋白的條件都不一樣，我現(xiàn)在想粗略的看一下誘導(dǎo)時間和溫度以及誘導(dǎo)劑添加量對誘導(dǎo)的影響，我用的誘導(dǎo)劑是IPTG。我想請教一下一般IPTG在溫度，時間，用量上有沒有通用的范圍或規(guī)則？我有看過文獻(xiàn)報道，說T7載體用IPTG誘導(dǎo)會容易形成包涵體。 而且我現(xiàn)在是粗略的誘導(dǎo)檢測有無蛋白表達(dá)，所以并沒有在OD=0.6-0.8時誘導(dǎo)，而且誘導(dǎo)一般是過夜誘的，誘導(dǎo)溫度20℃，不知會否對這種載體的誘導(dǎo)有影響？ 我的宿主細(xì)胞是BL21. 請同行高手給與指教！ |
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3樓2012-02-23 21:16:44
2樓2012-02-23 20:33:17
lxj341401
至尊木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 58
- 應(yīng)助: 388 (碩士)
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4樓2012-02-23 21:30:27
5樓2012-02-24 09:35:38
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