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yangjunzju木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
【求助/交流】IPTG含量 已有4人參與
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各位蟲(chóng)友： 請(qǐng)教一個(gè)問(wèn)題，我們做蛋白誘導(dǎo)表達(dá)時(shí)經(jīng)常要用到IPTG誘導(dǎo)，但是當(dāng)加入一定量的IPTG后，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后我想知道IPTG是否會(huì)被菌體降解。如何確定IPTG在菌液中的含量呢？非常感謝 |
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susizheng
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9樓2010-01-29 12:48:45
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2樓2010-01-28 22:00:52
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3樓2010-01-29 09:25:05
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yangjunzju(金幣+1):謝謝參與
yangjunzju(金幣+1):謝謝參與
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肯定不會(huì)被降解。否則就不會(huì)選擇IPTG作為誘導(dǎo)劑了。 我推薦樓主看下下面這個(gè)文獻(xiàn)：是關(guān)于自誘導(dǎo)培養(yǎng)的。解決了本底表達(dá)的問(wèn)題，表達(dá)量可以比IPTG誘導(dǎo)提高好幾倍。主要改良的就是培養(yǎng)基，用這個(gè)培養(yǎng)基，就不需要在中途測(cè)OD，加誘導(dǎo)劑了。整個(gè)表達(dá)一步完成。好像也可以不加抗生素。作者是pET系統(tǒng)的發(fā)明者studier。 我自己做過(guò)，效果很好。有問(wèn)題歡迎交流。 |
4樓2010-01-29 09:34:53
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