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na_8337銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】急！SDS-page電泳成像 已有3人參與
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| 急求助：SDS-page除了用凝膠成像儀，還可以用什么看膠？用紫外可以么？或者用什么工具可以計(jì)算蛋白的大��？謝謝！急！急！急 |
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2樓2010-01-30 08:36:47
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3樓2010-01-30 09:51:20
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amisking(金幣+2): 2010-01-30 13:50
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有圖有真相，上圖！ 分子量的計(jì)算或者估算只通過(guò)一種方法是不夠準(zhǔn)確的，只跑一個(gè)變性膠，依靠MARKER才估算只能是一個(gè)大概，而且分子量的大小跟條帶的遷移率不是簡(jiǎn)單的直線關(guān)系，換算稍微有點(diǎn)依靠經(jīng)驗(yàn)的成分。再之，SDS之后的蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)是被破壞了的，要是多亞基的話就更難估計(jì)了�？礃幼訕侵魇切率�。 |
6樓2010-01-30 13:39:03
na_8337
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8樓2011-04-15 14:08:47
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dhd997(金幣+6, EPI+1): good 2011-04-16 09:20:02
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SDS是變性劑，有時(shí)候還加巰基乙醇（能把二硫鍵還原成巰基從而破壞四級(jí)結(jié)構(gòu)），所以SDS-PAGE應(yīng)該是得到單條多肽的。 一個(gè)酶的分子量為一萬(wàn)，依照氨基酸的平均分子量為128，算得約為78個(gè)殘基，ORF才234bp，算是很小的酶了。不過(guò)各種酶的一般分子量都有差別的，即使是同一種酶也還是有差別的。 核糖核酸酶和溶菌酶里都有分子量很小的成員，從10KD到100KD都有，所以如果你的酶真的很小，只要驗(yàn)證是正確的就不要擔(dān)心。 看附件 [ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-4-15 at 20:06 ] |
9樓2011-04-15 20:04:59
10樓2013-01-18 08:46:20
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