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microdiag鐵蟲 (初入文壇)
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[交流]
【原創(chuàng)】最新HRM技術(shù),應(yīng)用于SNP、突變和甲基化的檢測 已有2人參與
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現(xiàn)在大多臨床醫(yī)生沒有時間完成具體實驗,可以嘗試外包給技術(shù)服務(wù)公司,蘇州為真推出的基于HRM技術(shù)的SNP、突變和甲基化檢測的技術(shù)服務(wù),能夠幫助各位老師高質(zhì)量完成大量樣本的檢測。 現(xiàn)階段,大家檢測SNP時都用一貫的檢測方法,包括測序,探針還有DHPLC等等,而甲基化大多用MSP.至于HRM技術(shù)(高分辨率溶解曲線技術(shù))并不為大家所熟知,有兩個原因:1)適合做HRM技術(shù)的儀器太少了,而且在國內(nèi)的普及程度不高,具我了解能夠做HRM的有Roche LightCycler 480,Qiagen Roter-Gene 6000,ABI 7500 Fast和ABI7900HT Fast,Idaho LightScanncer.其中羅氏的480在其軟件分析上是做的最好的.2)HRM的實驗靈敏度太高,影響實驗因素過多,很多人都做了,但是就是做不出來.因此就放棄,就換用其他比較成熟的方法.殊不知,HRM技術(shù)的檢測方法有其他技術(shù)難以比擬的優(yōu)勢,不僅能實現(xiàn)高通量和高精度的同時,PCR和熒光定量在同一管內(nèi)進行,能夠有效避免假陽性. 作為新一代的遺傳掃描工具,HRM具有"簡,效,快,廉"等其他技術(shù)難以比擬的優(yōu)勢: 簡:無需序列特異性探針,不受堿基位點局限,同時檢出已知或未知突變、SNP和甲基化位點:閉管操作,避免交叉污染。 效:最低檢測0.1%-0,01%的突變或異常甲基化,檢測SNP靈敏度和特異性均為100%。 快:1次同時不多于384個樣本,在60-90分鐘內(nèi)完成檢測。 廉:簡化操作步驟、降低人工和試劑成本,費用遠少于測序、Taqman探針等方法。 HRM技術(shù)特別適用于樣本量多、檢測位點較少的SNP、突變或甲基化分析,是不同于基因芯片檢測方法(檢測位點多,樣本少)的高通量方法。同時,也是基因芯片篩選后的多個基因在更多標本中驗證的最佳方法。 |


鐵蟲 (初入文壇)

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