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bernadat金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助】想知道指紋圖譜跟高效液相色譜的最根本區(qū)別 已有7人參與
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| 要做指紋圖譜了，看來看去沒發(fā)現(xiàn)高效液相色譜跟指紋圖譜有什么根本區(qū)別，用的檢測器可以是一樣，只不過指紋圖譜跑的時間都很長，都采用了梯度洗脫，盡量要保證所有成分都出來，難道這就是兩者的區(qū)別？？？很想知道答案，望過客不吝賜教 |
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bernadat(金幣+3): 2010-03-17 08:51
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誠如2樓所說，指紋圖譜有很多種，如果樓主做的是HPLC指紋圖譜，那么HPLC指紋圖譜用的譜圖就是HPLC的譜圖，但是指紋圖譜跟常規(guī)用HPLC檢測幾個目標(biāo)物是有區(qū)別的。 常規(guī)用HPLC做目標(biāo)物檢測，只要目標(biāo)物能夠獲得足夠的分離度，峰形漂亮，峰面積足夠就基本搞定了。但是如果做指紋圖譜，不僅要用梯度洗脫、延長洗脫時間等手段保證里面的物質(zhì)盡量洗脫出來，而且要保證出來的各個峰的峰面積差異不能過大，否則在后續(xù)做圖譜相似度匹配時，大峰占據(jù)的比重過大，對整個樣品間相似度評價的貢獻過大，這樣的指紋圖譜就不完美了，不具用該指紋圖譜來定性該藥物的專屬性，因此如果用的是紫外檢測器或者是DAD檢測器時，除了優(yōu)化洗脫外，對檢測器條件的優(yōu)化也是非常重要的，具體優(yōu)化過程可能比目標(biāo)物檢測要復(fù)雜得多。 從指紋圖譜的概念出發(fā)，你的圖譜要保證穩(wěn)定性、模糊性和專屬性。 穩(wěn)定性即同一批藥材出來的指紋圖譜要能完美重復(fù)，相似度匹配率要高。 模糊性即不能只著眼優(yōu)化單個峰，不能用這少數(shù)兩三個峰來代表該藥材，而是用整張圖譜來代表該藥材。在保證整個圖譜的整體分離度基礎(chǔ)上可以犧牲部分個別峰的分離度。從信息論的觀點看，如果整張圖譜所有峰的分離度總和最大，可以代表著該圖譜含有最大化的化學(xué)信息，這就足夠。 專屬性就是這張圖譜要有跟其他藥物的圖譜區(qū)別俄地方，不能兩個藥物做出的圖譜的相似度很高，那么這個指紋圖譜就代表不了任何藥物了。該藥物的指紋圖譜要具有該藥物區(qū)別于其他藥物的特征，不一定是分離出越多的物質(zhì)就越好，如果專屬性足夠，犧牲個別峰的分離度，使分離檢測條件相對簡化，分析時間相對減少也是可行的，而且簡化的條件還能提高圖譜的重現(xiàn)性。 |
4樓2010-03-13 18:27:33
yunmeng6001
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。這樣說就是沒什么差別啊。 
2樓2010-03-13 13:39:40
catjaja
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10樓2013-01-08 23:15:10
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