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bernadat金蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【求助】想知道指紋圖譜跟高效液相色譜的最根本區(qū)別 已有7人參與
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| 要做指紋圖譜了，看來(lái)看去沒(méi)發(fā)現(xiàn)高效液相色譜跟指紋圖譜有什么根本區(qū)別，用的檢測(cè)器可以是一樣，只不過(guò)指紋圖譜跑的時(shí)間都很長(zhǎng)，都采用了梯度洗脫，盡量要保證所有成分都出來(lái)，難道這就是兩者的區(qū)別？？？很想知道答案，望過(guò)客不吝賜教 |
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wakan
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bernadat(金幣+3): 2010-03-17 08:51
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誠(chéng)如2樓所說(shuō)，指紋圖譜有很多種，如果樓主做的是HPLC指紋圖譜，那么HPLC指紋圖譜用的譜圖就是HPLC的譜圖，但是指紋圖譜跟常規(guī)用HPLC檢測(cè)幾個(gè)目標(biāo)物是有區(qū)別的。 常規(guī)用HPLC做目標(biāo)物檢測(cè)，只要目標(biāo)物能夠獲得足夠的分離度，峰形漂亮，峰面積足夠就基本搞定了。但是如果做指紋圖譜，不僅要用梯度洗脫、延長(zhǎng)洗脫時(shí)間等手段保證里面的物質(zhì)盡量洗脫出來(lái)，而且要保證出來(lái)的各個(gè)峰的峰面積差異不能過(guò)大，否則在后續(xù)做圖譜相似度匹配時(shí)，大峰占據(jù)的比重過(guò)大，對(duì)整個(gè)樣品間相似度評(píng)價(jià)的貢獻(xiàn)過(guò)大，這樣的指紋圖譜就不完美了，不具用該指紋圖譜來(lái)定性該藥物的專(zhuān)屬性，因此如果用的是紫外檢測(cè)器或者是DAD檢測(cè)器時(shí)，除了優(yōu)化洗脫外，對(duì)檢測(cè)器條件的優(yōu)化也是非常重要的，具體優(yōu)化過(guò)程可能比目標(biāo)物檢測(cè)要復(fù)雜得多。 從指紋圖譜的概念出發(fā)，你的圖譜要保證穩(wěn)定性、模糊性和專(zhuān)屬性。 穩(wěn)定性即同一批藥材出來(lái)的指紋圖譜要能完美重復(fù)，相似度匹配率要高。 模糊性即不能只著眼優(yōu)化單個(gè)峰，不能用這少數(shù)兩三個(gè)峰來(lái)代表該藥材，而是用整張圖譜來(lái)代表該藥材。在保證整個(gè)圖譜的整體分離度基礎(chǔ)上可以犧牲部分個(gè)別峰的分離度。從信息論的觀點(diǎn)看，如果整張圖譜所有峰的分離度總和最大，可以代表著該圖譜含有最大化的化學(xué)信息，這就足夠。 專(zhuān)屬性就是這張圖譜要有跟其他藥物的圖譜區(qū)別俄地方，不能兩個(gè)藥物做出的圖譜的相似度很高，那么這個(gè)指紋圖譜就代表不了任何藥物了。該藥物的指紋圖譜要具有該藥物區(qū)別于其他藥物的特征，不一定是分離出越多的物質(zhì)就越好，如果專(zhuān)屬性足夠，犧牲個(gè)別峰的分離度，使分離檢測(cè)條件相對(duì)簡(jiǎn)化，分析時(shí)間相對(duì)減少也是可行的，而且簡(jiǎn)化的條件還能提高圖譜的重現(xiàn)性。 |
4樓2010-03-13 18:27:33
yunmeng6001
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。這樣說(shuō)就是沒(méi)什么差別啊。 
2樓2010-03-13 13:39:40
catjaja
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3樓2010-03-13 14:54:13
5樓2010-03-13 21:44:09
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