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[交流]
【求助/交流】想問一下凝膠電泳緩沖溶液的配置 已有7人參與
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| 我想做個凝膠電泳，但是緩沖溶液不太清楚怎么配置，我看到我們實驗室有原來師姐留下的藥品，有一瓶是10XTE，不知道TE和TAE、TBE有什么區(qū)別呢？在網(wǎng)上看到有個1TE的配方，是不是我用的時候?qū)⒛莻�10TE的稀釋十倍就行了呢？ |
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shuwenying
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amisking(金幣+3): 2010-04-26 12:35
jiaqch111(金幣+3):謝謝 2010-04-26 14:30
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amisking(金幣+3): 2010-04-26 12:35
jiaqch111(金幣+3):謝謝 2010-04-26 14:30
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你是做什么凝膠電泳？？？瓊脂糖吧？TE是用來溶解DNA之類的，不是用來電泳的。 TAE是使用最廣泛的緩沖系統(tǒng)。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質(zhì)量（TBE中電泳時測出的相對分子質(zhì)量會大于實際分子質(zhì)量），且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%，電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統(tǒng)進行電泳。TAE的缺點是緩沖容量小，長時間電泳（如過夜）不可選用，除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。 TBE的特點是緩沖能力強，長時間電泳時可選用TBE，并且當用于電泳小于1kb的片段時分離效果更好。TBE用于瓊脂糖凝膠時易造成高電滲作用，并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價結(jié)合的四羥基硼酸鹽復合物而使DNA片段的回收率降低，所以不宜在回收電泳中使用。 我們跑瓊脂糖凝膠電泳用的是0.5*TBE，配制瓊脂糖凝膠也是用0.5*TBE的，電泳液的使用濃度常常是各個實驗室根據(jù)自己的情況定的，我們也沒有具體研究過濃度問題，實驗室一貫用這個濃度，就用這個濃度了 TAE似乎跑電泳會快一點，TBE容易沉淀而且不能配制太高的儲備液濃度，但是個人覺得，TBE跑出來的條帶好看一點啊，我們實驗室一貫用TBE的。 |
2樓2010-04-26 10:51:28
3樓2010-04-26 11:08:30
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