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jiaqch111銀蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助/交流】想問一下凝膠電泳緩沖溶液的配置 已有7人參與
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| 我想做個(gè)凝膠電泳，但是緩沖溶液不太清楚怎么配置，我看到我們實(shí)驗(yàn)室有原來師姐留下的藥品，有一瓶是10XTE，不知道TE和TAE、TBE有什么區(qū)別呢？在網(wǎng)上看到有個(gè)1TE的配方，是不是我用的時(shí)候?qū)⒛莻�(gè)10TE的稀釋十倍就行了呢？ |
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4樓2010-04-26 13:33:57
shuwenying
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amisking(金幣+3): 2010-04-26 12:35
jiaqch111(金幣+3):謝謝 2010-04-26 14:30
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
amisking(金幣+3): 2010-04-26 12:35
jiaqch111(金幣+3):謝謝 2010-04-26 14:30
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你是做什么凝膠電泳？？？瓊脂糖吧？TE是用來溶解DNA之類的，不是用來電泳的。 TAE是使用最廣泛的緩沖系統(tǒng)。其特點(diǎn)是超螺旋在其中電泳時(shí)更符合實(shí)際相對(duì)分子質(zhì)量（TBE中電泳時(shí)測(cè)出的相對(duì)分子質(zhì)量會(huì)大于實(shí)際分子質(zhì)量），且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%，電泳大于13kb的片段時(shí)用TAE緩沖液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時(shí)也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。TAE的缺點(diǎn)是緩沖容量小，長(zhǎng)時(shí)間電泳（如過夜）不可選用，除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。 TBE的特點(diǎn)是緩沖能力強(qiáng)，長(zhǎng)時(shí)間電泳時(shí)可選用TBE，并且當(dāng)用于電泳小于1kb的片段時(shí)分離效果更好。TBE用于瓊脂糖凝膠時(shí)易造成高電滲作用，并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價(jià)結(jié)合的四羥基硼酸鹽復(fù)合物而使DNA片段的回收率降低，所以不宜在回收電泳中使用。 我們跑瓊脂糖凝膠電泳用的是0.5*TBE，配制瓊脂糖凝膠也是用0.5*TBE的，電泳液的使用濃度常常是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)自己的情況定的，我們也沒有具體研究過濃度問題，實(shí)驗(yàn)室一貫用這個(gè)濃度，就用這個(gè)濃度了 TAE似乎跑電泳會(huì)快一點(diǎn)，TBE容易沉淀而且不能配制太高的儲(chǔ)備液濃度，但是個(gè)人覺得，TBE跑出來的條帶好看一點(diǎn)啊，我們實(shí)驗(yàn)室一貫用TBE的。 |
2樓2010-04-26 10:51:28
jiaqch111
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3樓2010-04-26 11:08:30
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5樓2010-04-26 14:23:56
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