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dfl204鐵桿木蟲 (著名寫手)
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[交流]
【求助/交流】請教原核表達(dá)菌株Rosetta gami（DE3）的生長時(shí)間 已有4人參與
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各位好，昨天剛剛轉(zhuǎn)了幾個(gè)質(zhì)粒到Rosett agami（DE3）菌株中，加上其本身的三種抗性，連同質(zhì)粒的抗性一共是加了四種抗生素。到現(xiàn)在已經(jīng)有快18個(gè)小時(shí)還沒有單克隆出現(xiàn)。 請問用過這個(gè)菌株的蟲友們要多長時(shí)間才能長出來？ 謝謝！ |
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hxwhu
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HarveyWang
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amisking(金幣+3): 2010-04-27 12:23
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
amisking(金幣+3): 2010-04-27 12:23
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需要大約24hr，而且也就是大約1mm直徑。 大小就是 如以下的句號一樣 。 。。 。。 。。。 。 。。 。 。 。 。。。 。 。。 。。 。。 。。。 。。。 。 。 。 。。 。 。 比BL21DE3長的緩慢多了！這主要是Tet 抗性的原因，而不是其他抗生素造成的。據(jù)我的經(jīng)驗(yàn)，Tet對重組蛋白表達(dá)許多時(shí)候沒有好處。 可以考慮不用加Tet 。只利用其密碼子偏好的Cam 抗性和你質(zhì)粒的抗性就行了。 [ Last edited by HarveyWang on 2010-4-27 at 10:42 ] |
2樓2010-04-27 10:40:09
dfl204
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5樓2010-11-23 08:53:18
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