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liang_jia_bi銅蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
【求助】懸賞10金幣，關(guān)于水相中EDCI縮合反應(yīng)條件和DTT顏色變化問(wèn)題 已有3人參與
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最近在做一個(gè)修飾透明質(zhì)酸的實(shí)驗(yàn)，目的是鍵合上巰基： 方法：1、用EDCI讓透明質(zhì)酸上的羧基與二硫代丙酸酰肼反應(yīng)（中間是一二硫鍵），然后用DTT打開(kāi)二硫鍵，游離出巰基 問(wèn)題：1、關(guān)于EDCI縮合反應(yīng)：a：看見(jiàn)很多帖子說(shuō)該試劑是要在無(wú)水條件下反應(yīng)，pH偏堿，而參考的文獻(xiàn)是在水相中反應(yīng)，pH為4.75；b：我做的時(shí)候有點(diǎn)奇怪，我是先加二硫代丙酸酰，調(diào)pH4.75，EDCI加入后，體系pH緩緩上升到6.6左右，我繼續(xù)調(diào)酸，發(fā)現(xiàn)把酸度調(diào)下來(lái)，pH又慢慢升回去，調(diào)下去又升上來(lái)，無(wú)論我加1ml酸，還是3ml酸，最終pH都是六點(diǎn)多，不知是否應(yīng)該加入更大量酸，調(diào)到pH4.75為止。 2、關(guān)于DTT反應(yīng)：文獻(xiàn)上DTT調(diào)pH8.5反應(yīng)24h，調(diào)pH3.5終止反應(yīng)，我做過(guò)幾回，有時(shí)DTT加入后顏色變紅，調(diào)pH3.5后，顏色退去，有一次是pH調(diào)成3.5后紅色布退，有2次是DTT加入后部顯淡紅色，想知道DTT的顏色到底有什么有關(guān)。 |
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liang_jia_bi
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4樓2013-09-17 20:35:21
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