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【求助】懸賞10金幣,關(guān)于水相中EDCI縮合反應(yīng)條件和DTT顏色變化問題 已有3人參與
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最近在做一個修飾透明質(zhì)酸的實驗,目的是鍵合上巰基: 方法:1、用EDCI讓透明質(zhì)酸上的羧基與二硫代丙酸酰肼反應(yīng)(中間是一二硫鍵),然后用DTT打開二硫鍵,游離出巰基 問題:1、關(guān)于EDCI縮合反應(yīng):a:看見很多帖子說該試劑是要在無水條件下反應(yīng),pH偏堿,而參考的文獻(xiàn)是在水相中反應(yīng),pH為4.75;b:我做的時候有點奇怪,我是先加二硫代丙酸酰,調(diào)pH4.75,EDCI加入后,體系pH緩緩上升到6.6左右,我繼續(xù)調(diào)酸,發(fā)現(xiàn)把酸度調(diào)下來,pH又慢慢升回去,調(diào)下去又升上來,無論我加1ml酸,還是3ml酸,最終pH都是六點多,不知是否應(yīng)該加入更大量酸,調(diào)到pH4.75為止。 2、關(guān)于DTT反應(yīng):文獻(xiàn)上DTT調(diào)pH8.5反應(yīng)24h,調(diào)pH3.5終止反應(yīng),我做過幾回,有時DTT加入后顏色變紅,調(diào)pH3.5后,顏色退去,有一次是pH調(diào)成3.5后紅色布退,有2次是DTT加入后部顯淡紅色,想知道DTT的顏色到底有什么有關(guān)。 |
銀蟲 (初入文壇)
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