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[交流]
【求助】反相色譜條件的摸索 已有3人參與
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| 一般高效液相反相色譜的色譜條件是怎么摸索的? |
木蟲 (小有名氣)
| 個(gè)人認(rèn)為:首先,先確定你所分析的成分的極性,選擇相應(yīng)的流動(dòng)相和合適的柱子(相似相容原理);其次,確定成分的吸收波長(zhǎng);再次,就是調(diào)節(jié)流動(dòng)相的比例和流動(dòng)相的流速就行了。一般流動(dòng)相先選擇最常用的甲醇、乙腈和水試一下(一般情況下,乙腈對(duì)有機(jī)物的洗脫能力比甲醇強(qiáng)點(diǎn)),根據(jù)出峰時(shí)間和峰形對(duì)流動(dòng)相的比例和流速進(jìn)行調(diào)整,必要時(shí)進(jìn)行梯度洗脫。 |
金蟲 (著名寫手)

鐵蟲 (初入文壇)
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1、通過(guò)紫外掃描確定最大的吸收波長(zhǎng),或者直接用二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè),從中找到特定的波長(zhǎng)。 2、洗脫從5%的甲醇或者乙腈開始,一直洗到100%的甲醇或者乙腈,用時(shí)1~2h。 3、根據(jù)上述洗脫情況,進(jìn)行簡(jiǎn)化,得到相對(duì)適合的洗脫條件。 4、改變洗脫劑的pH值,考察pH值對(duì)洗脫效果的影響 5、得到最佳的洗脫條件。 |
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金蟲 (小有名氣)

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