 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2295 | 回復(fù): 5 | |||
[交流]
【求助】超氧化物歧化酶活性測定方法 已有3人參與
|
| 請教一下各位高手，有誰在做植物體超氧化物歧化酶活性試驗(yàn)的測定嗎？或者哪位有測定方法�。ㄗ詈檬菢�(biāo)準(zhǔn)操作方法）跪求。急切盼望回帖。謝謝！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
一志愿中南化學(xué)337求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
281求調(diào)劑（0805）
已經(jīng)有23人回復(fù)
-
265求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
279分求調(diào)劑 一志愿211
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
招收調(diào)劑碩士
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
296求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
招收博士1-2人
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
085700資源與環(huán)境308求調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
274求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
290求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 蝦蟹類的抗逆性指標(biāo)有哪些？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- SOD比活力測定有什么意義
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于SOD活性測定中加甲硫氨酸
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】請問測定真菌酶SOD活性，過濾后，研磨前的真菌如何保存？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 李合生 過氧化物酶（POD）活性測定
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于SOD活性測定中加甲硫氨酸的作用
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 【求助】SOD活性測定方法
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 保健食品功能學(xué)評價程序與檢驗(yàn)方法規(guī)范
已經(jīng)有5人回復(fù)
hha123
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 5457.4
- 紅花: 1
- 帖子: 707
- 在線: 15.4小時
- 蟲號: 779530
- 注冊: 2009-05-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
★ ★
2814502(金幣+1):謝謝 2010-05-07 15:22:16
kolkata(金幣+2):謝謝應(yīng)助。不錯，鼓勵一下。 2010-05-14 21:48:31
2814502(金幣+1):謝謝 2010-05-07 15:22:16
kolkata(金幣+2):謝謝應(yīng)助。不錯，鼓勵一下。 2010-05-14 21:48:31
|
超氧化物歧化酶(suPeroXIde dIsMuTAse，簡稱SOD)是需氧生物中普遍存在的一種含金屬酶。它與過氧化物酶、過氧化氫酶等酶協(xié)同作用防御活性氧或其他過氧化物自由基對細(xì)胞膜系統(tǒng)的傷害；超氧化物歧化酶可以催化氧自由基的歧化反應(yīng)，生成過氧化氫，過氧化氫又可以被過氧化氫酶轉(zhuǎn)化成無害的分子氧和水。 2O-2＋2HH2O2＋O2 2H2O22H2O＋O2 已知此酶活力與植物抗逆性及衰老有密切關(guān)系，故成為植物逆境生理學(xué)的重要研究對象。 【原理】 依據(jù)超氧化物歧化酶抑制氮藍(lán)四唑(NBT)在光下的還原作用來確定酶活性大小。在有可氧化物存在下，核黃素可被光還原，被還原的核黃素在有氧條件下極易再氧化而產(chǎn)生O2，O2可將NBT還原為藍(lán)色的甲，后者在560nM處有最大吸收。而超氧化物歧化酶作為氧自由基的清除劑可抑制此反應(yīng)。于是光還原反應(yīng)后，反應(yīng)液藍(lán)色愈深，說明酶活性愈低，反之酶活性愈高。一個酶活單位定義為將NBT的還原抑制到對照一半(50％)時所需的酶量。 【儀器與用具】 高速臺式離心機(jī)；分光光度計；微量進(jìn)樣器；熒光燈(反應(yīng)試管處照度為4000lX)；15MM×150MM試管；黑色硬紙?zhí)住?br /> 【試劑】 0.05Mol／L磷酸緩沖液(PH78)； 提取介質(zhì)50MMol／L PH78磷酸緩沖液(內(nèi)含1％聚乙烯吡咯烷酮)； 130MMol／L甲硫氨酸(MeT)溶液：稱1339g MeT，用磷酸緩沖液溶解并定容至100Ml； 750μMol／LNBT：稱取0.0613g NBT，用磷酸緩沖液溶解并定容至100Ml，避光保存； 100μMol／L核黃素溶液提0.0075g，定容至100Ml，避光保存，隨用隨配，并稀釋10倍。 【方法】 1.酶液提取取一定部位的植物葉片(視需要定，去葉脈)0.5g于預(yù)冷的研體中，加2Ml預(yù)冷的提取介質(zhì)在冰浴下研磨成勻漿，加入提取介質(zhì)沖洗研缽，并使終體積為10Ml。取5Ml于4℃下10 000r／Min離心15Min，上清液即為SOD粗提液。 2.顯色反應(yīng)取透明度、質(zhì)地相同的15MM×150MM試管4支，2支為測定、2支為對照，按表22-1加入試劑。 混勻后，給1支對照管罩上比試管稍長的雙層黑色硬紙?zhí)渍诠猓c其他各管同時置于4000lx日光燈下反應(yīng)20～30Min(要求各管照光情況一致，反應(yīng)溫度控制在25～35℃之間，視酶活性高低適當(dāng)調(diào)整反應(yīng)時間)。 3SOD活性測定與計算至反應(yīng)結(jié)束后，用黑布罩蓋上試管，終止反應(yīng)。以遮光的對照管作為空白，分別在560nM波長下測定各管的吸光度，按式22-1計算SOD活性。 表22-1顯色反應(yīng)試劑配制表 試劑名稱用量（ml)終濃度（比色時）0.05mol/L磷酸緩沖液1.5130mmol/L Met溶液0.313mmol750μmol/L NBT溶液0.375μmol100μmol/L EDTA-Na2液0.310μmol20μmol/L核黃素0.32.0μmol酶液0.10對照2支管以緩沖液代替蒸餾水0.5總體積3.3SOD活性＝(A0-As)×VTA0×0.5×FW×V1（22-1） SOD比活力＝SOD總活性蛋白質(zhì)濃度（22-2） 式中SOD總活性以每克鮮重酶單位表示；比活力單位以每毫克蛋白酶單位、酶單位／Mg表示； A0：照光對照光管的光吸收值； AS：樣品管的光吸收值； VT：樣液總體積(Ml)； V1：測定時樣品用量(Ml)； ＦW：樣品鮮重(g)； 蛋白質(zhì)濃度單位為每克鮮重含蛋白毫克數(shù)(Mg／g)。 【附注】 當(dāng)測定樣品數(shù)量較大時，可在臨用前根據(jù)用量將表22-1中各試劑(酶液和核黃素除外)按比例混合后一次加入290Ml，然后依次加入核黃素和酶液，使終濃度不變，其余各步與上相同。 |
2樓2010-05-06 16:09:35
3樓2010-05-07 15:24:40
zerojs
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 43.5
- 帖子: 2
- 在線: 5.5小時
- 蟲號: 488318
- 注冊: 2007-12-29
- 專業(yè): 環(huán)境地球化學(xué)
4樓2010-05-09 09:44:02
hha123
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 5457.4
- 紅花: 1
- 帖子: 707
- 在線: 15.4小時
- 蟲號: 779530
- 注冊: 2009-05-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
5樓2010-05-14 16:08:17
lxctszcg
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 80
- 帖子: 7
- 在線: 4.5小時
- 蟲號: 2384325
- 注冊: 2013-03-28
- 性別: MM
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
6樓2013-06-15 12:31:12
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 2814502 的主題更新
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085700資源與環(huán)境308求調(diào)劑 +10 | 墨墨漠 2026-03-18 | 11/550 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿西南交通 專碩 材料355 本科雙非 求調(diào)劑 +4 | 西南交通專材355 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +6 | 困于星晨 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料080500調(diào)劑求收留 +6 | 一顆meteor 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[論文投稿]
申請回稿延期一個月，編輯同意了。但系統(tǒng)上的時間沒變，給編輯又寫郵件了，沒回復(fù)
 10+3
|
wangf9518 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 ，六級已過，有科研經(jīng)歷 +12 | 曦熙兮 2026-03-15 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑，一志愿華南理工大學(xué)071005 +5 | ioodiiij 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +4 | z1z2z3879 2026-03-14 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 324分 085600材料化工求調(diào)劑 +3 | llllkkkhh 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +11 | 冬十三 2026-03-15 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +10 | z1z2z3879 2026-03-16 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +12 | 小熊joy 2026-03-14 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +11 | zjl的號 2026-03-16 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +5 | 上岸的小葡 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +4 | 是Lupa啊 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專碩326求調(diào)劑 +6 | 墨煜姒莘 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[論文投稿] 有沒有大佬發(fā)小論文能帶我個二作 +3 | 增銳漏人 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +3 | Yy7400 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +4 | 學(xué)海漂泊 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +4 | 學(xué)員97LZgn 2026-03-13 | 4/200 |
|